"DH82 Adherent狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腎；Golden Retrieve
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶?jī)?nèi)沒有血清了，減少對(duì)胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì))，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
DH82 Adherent狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
CD 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU1919細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞
LoMeT-ccRcc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMCs細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞
Evsa-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuNS1細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞
CNE2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細(xì)胞、COS-1細(xì)胞、CNE細(xì)胞
H-1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細(xì)胞、H1734細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
DH82 Adherent狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
A2780S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞
Jurkat clone A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞
HIT.T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M3 Clone M-3細(xì)胞、H7721細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞
B16-F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs737T細(xì)胞、AK細(xì)胞、HOEC細(xì)胞
IPLB-SF-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z-138細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞、786O細(xì)胞
FU-MMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1a細(xì)胞、H-522細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞
SKNBE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞
MV 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞
VB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H526細(xì)胞、H-2452細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞
SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞
Simpson細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERFLCMS細(xì)胞、TE-9細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞
Caov-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR983F細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞、SW13細(xì)胞
HSAEC1-KT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞、H-1623細(xì)胞
DH82 Adherent狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞系
MDA-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA1細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞
TE 671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC15細(xì)胞、RT4細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞
SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞
SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞
KU 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9 (Hamprecht)細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞
LL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
MODE-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞、H-69細(xì)胞
HS-294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-4細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞
NB4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2細(xì)胞、H524細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞
MUM2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL4細(xì)胞、H-187細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞
LAN5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞
H-1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞
SK MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞、RGCs細(xì)胞
MSTO-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC2細(xì)胞、TFK1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞
MV4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細(xì)胞、K1細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞
BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞
NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
Y3Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS1細(xì)胞、SNU16細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞
GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞
RKO-AS-45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞
MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞
Hs895T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞
MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞
SUM 102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細(xì)胞、BC-009細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞
JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞
L-363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞
Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞
SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Plaepi 34細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞、BHT101細(xì)胞
WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞
WC00044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞
NB1RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、H-1819細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
SJCRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞、NCI660細(xì)胞
A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞
DH82 Adherent狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞系
OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞
3T3-A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞
NL20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN m5F細(xì)胞、MLFC細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞
MEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
SNU-484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T.T細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞
L78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929(NCTC)細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞
NCI-H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞
LTEP-s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC6細(xì)胞、Mino細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞
Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、PK-15細(xì)胞、SNK1細(xì)胞
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