"A-375 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：A３７５源自一位５４歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在瓊脂上形成克隆。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分，減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-375 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
TE11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞
Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
UACC812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
OCI/AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
細胞生長特性：貼壁
A-375 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸渾細胞誤認為死細胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細胞置于-８０℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
FHL-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
BJA-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
IEC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
MDAPCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
NCI-H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
NSC34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞
SGC7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞
SUM159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
A-375 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
KMBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
VERO76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
HIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
DiFi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
OPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞
HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
Leukemia 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
NCIH2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
HET1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
HS578細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
NCI H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
HRVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
RGC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
RAT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
MIHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
PaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
T84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞
CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
Hs 839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
Neuro 2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞
HCC-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞
MES23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞
HT-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
MRAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞
HKBML細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
NT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
Med 283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞
CCRF CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO81-1細胞、MKN 7細胞、2PK-3細胞
MC3T3-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
NBL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞
PNT1/A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
A-375 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
AtT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
KRC/Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
HGC27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞
38C13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
QGY-7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞
SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
L-5178-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
MADB 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT FET細胞、RCK-8細胞、A431細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS細胞、Colon-38細胞、RBE4細胞
UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細胞、C33A細胞、UMUC1細胞
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