"5-8F Adherent鼻咽癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
5-8F Adherent鼻咽癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
SUDHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H345細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞、H-676B細(xì)胞
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞
MPC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK 1細(xì)胞、H1238細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
WM35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172細(xì)胞、293F細(xì)胞、H-2286細(xì)胞
BHK 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-1細(xì)胞、LLC細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞
Colo205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
5-8F Adherent鼻咽癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
DR2R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GNM細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞
Panc-08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-I細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞
SW 837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞
REC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-82細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞
LADMAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞
HuH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C7細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞
VK2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細(xì)胞、H660細(xì)胞、C17細(xì)胞
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞
SUM52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT-20細(xì)胞、451Lu細(xì)胞、JM1細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
ECC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞
UACC-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞、H69C細(xì)胞
5-8F Adherent鼻咽癌細(xì)胞系
RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAntle cell VERona-1細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞、J111細(xì)胞
Hs-688A-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP.FGC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞
R.K.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134-VI細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
HCO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU368細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞
KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞
HCC1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute-38細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞
HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞
Me-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞、SW837細(xì)胞
CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞
H-920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM3細(xì)胞、SNU475細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
PL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞
BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞
HCS-2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 c18細(xì)胞、PVEC細(xì)胞、GM03570細(xì)胞
HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞
RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞
SK LU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT6細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞
Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIHA細(xì)胞、H-1437細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞
RFL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC2B細(xì)胞、PG13細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞
H-2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML4細(xì)胞、HCC827細(xì)胞、H-128細(xì)胞
M-07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞
NCI-H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-T4細(xì)胞、MCA205細(xì)胞、BT 20細(xì)胞
CAL-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW837細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
L5178YR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞
SK-LMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞
Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞
INS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL1細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞
MFM-223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU-1細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞
8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞
IA-LM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-19Lu細(xì)胞、H2009細(xì)胞、H-220細(xì)胞
BJA-B-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES1細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞
5-8F Adherent鼻咽癌細(xì)胞系
PCI-4.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細(xì)胞、D-283細(xì)胞、DMS114細(xì)胞
KS-SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞
SNU449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
ATN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞、H1915細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞
Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞
Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞
H-1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-3細(xì)胞、MLMEC細(xì)胞、CPA47細(xì)胞
H-889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞
KOSC-2 cl3-43細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu6細(xì)胞、YD38細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞
SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞
SW 837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、GM3570細(xì)胞
"