"HCC95 Adherent人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過(guò)程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
HCC95 Adherent人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞
SUM-159-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、SW1271細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞
VP229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1222細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
EC-9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-s細(xì)胞、BaF3細(xì)胞、G292細(xì)胞
OVCA 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES2細(xì)胞、NT-2細(xì)胞、HOC細(xì)胞
HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細(xì)胞、HGE細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分
HCC95 Adherent人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開(kāi)紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒(méi)用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒(méi)了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
HEH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、SNU119細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞
293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細(xì)胞、T_T_細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞
BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞
RMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-2細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞
CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞
HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
SCLC-21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞
Gerner 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細(xì)胞、RT 112細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞
SPDC-CCL141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HEH-2細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞
SF-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSMC細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞、Ly8細(xì)胞
HCC95 Adherent人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
Scott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞、SW1116細(xì)胞
P3JHR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC7細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞
Bat lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm細(xì)胞、SHI1細(xì)胞、H-187細(xì)胞
H7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、PY8119細(xì)胞
T-ALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H716細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞
S3 HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞
YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞
KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞
Porcine Kidney-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞
Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞
SW 1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞
NCIH146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H64細(xì)胞、A375SM細(xì)胞、293-F細(xì)胞
SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞
CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞
SF-763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞
bEnd3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-7細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞
ATN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR 10細(xì)胞、GM-215細(xì)胞、H-727細(xì)胞
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞
293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞
MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞
GM00346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、BT474細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞
HCT-FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 50細(xì)胞、H3255細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞
Caki2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2C細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞
CX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH7777細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞、H-716細(xì)胞
GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
UACC812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-719細(xì)胞、HAEC細(xì)胞、SW1990細(xì)胞
JKT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEYA8細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞
COLO320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞
PANC-08-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞
MLA144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA7細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞
SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435細(xì)胞、H-82細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR細(xì)胞、U937細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞
PK-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIGI細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞、GB1細(xì)胞
MCF-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-741細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞、GRSL細(xì)胞
NCI-HUT-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞
293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc327細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞
HFF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞
HDQ-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細(xì)胞、A-673細(xì)胞、HIEC細(xì)胞
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞
HCC95 Adherent人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
RSC96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、H-322細(xì)胞、Y 1細(xì)胞
HLEB3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
KY180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1353細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞
293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMC-1細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞
NCI-H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-8細(xì)胞、HCT116細(xì)胞、Fao細(xì)胞
B16-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
U266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1651細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、JS1細(xì)胞
MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1112Sk細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞
BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞
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