"HEK293-F Adherent人胚腎細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HEK293-F Adherent人胚腎細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
LO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞
PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
RKO-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞
IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞
細胞生長特性:貼壁生長;懸浮生長
HEK293-F Adherent人胚腎細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞
MyLa2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-24細胞、PC 61 5.3細胞、NCI-H1781細胞
SKOV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞
HCC2157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
CHO-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
HRPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞
UCLA-SO-M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞
Caco-2/BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
Hs-578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN 60細胞、P3-Jiyoye細胞、UMR-106細胞
MDA175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL28細胞、HN6細胞、MDA-MB-435細胞
DoHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSCs(mUCMSCs)細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
HEK293-F Adherent人胚腎細胞系
BEL-7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞
Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
MCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
TGW細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
GM03573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞
Y79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-1細胞、MAVER細胞、NCI-H211細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
MDA MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS-9L細胞、T-ALL1細胞、KMST-6細胞
A-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB468細胞、HCC1937細胞、P30-OHK細胞
SUDHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞
Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
MFE296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL1細胞、CCD-841CoTr細胞、HBL1細胞
MCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG5細胞、GES-1細胞、L132細胞
CV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞
COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
PMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
NCI-H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta TC6細胞、TE671細胞、CCRF/CEM/0細胞
33604細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-18細胞、H-711細胞、U118細胞
THLE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
CHL/IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞
JVM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞
GP293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
Sci-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
GM04154B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
HCT-8/V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
LN 382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞
STC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-686細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞、NIH/3T3細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞
FM88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞
GM346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
SK-NMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞
Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
GM-3573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞
NCI-H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
HEK293-F Adherent人胚腎細胞系
H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
NFS 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
P-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞
FHL124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
CCD33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞
PLB985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞
MDA MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞
Hs600T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK1細胞、COLO 320 DM細胞、HCT-116細胞
NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-14細胞、GA-10細胞、RKO-AS-45-1細胞
SKOV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細胞、HBE 135-E6/E7細胞、Hs739T細胞
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