"COLO 829 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
COLO 829 Adherent人黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
NCIH1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
MCF-7/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
H-2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
JM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞
SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品：22Rv-1細胞、Mo7e細胞、GC9811-P細胞
細胞生長特性：貼壁生長
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細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風(fēng)機不能過大，風(fēng)機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
AdHek細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞
Panc08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
2B4-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞
Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
SW 900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞
AdHek細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞
SK-MEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞
SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
OVISE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞
CEM T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞
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KY180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞
EB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞
OV1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-30細胞、Colon38細胞、KMS-18細胞
OV1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-30細胞、Colon38細胞、KMS-18細胞
HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
ROS17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞
Vero-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞
BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
GM05887A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞
CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
H-2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞
Y79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-1細胞、MAVER細胞、NCI-H211細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
SW-1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞
hMSC-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞
PVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞
CT26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞
NCTC-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
IPLB-SF-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
MV4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
Jurkat 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Kupffer細胞
32D-Cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FT-293細胞、Co 115細胞、H1581細胞
KU 812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
NCI-H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
RERF-LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
SK-MEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞
Caov-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞
KMS-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
MRC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
GM16136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
PA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
Hs832.Tc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞
HuTu-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
COLO 829 Adherent人黑色素瘤細胞系
SK Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞
HIBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞
CT-26 WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞
SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞
BE(2)M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞
NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
MLE 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA144細胞、BEL/FU細胞、BLO11細胞
Tregs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細胞、SKM-1細胞、HuT78細胞
HuT102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801D細胞、WERI-Rb-1細胞、SUD4細胞
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