"SKM-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)時分布不均勻,通常操作步驟:做細胞生物學(xué)實驗,細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細胞懸液,沿孔壁(稍離開一點孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(zhuǎn)(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔依此類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細胞懸液會平鋪在整個孔底,注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后),先順時針搖晃3次,馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SKM-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及:經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng);MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度;BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的,現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型,包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞;Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng);RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
BERH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞
MIMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞
細胞傳代方法:1:2傳代;
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
SK.MEL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain KB細胞、NIH-3T3-L1細胞、95-D細胞
A-375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞
細胞生長特性:貼壁生長
SKM-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞特點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞的教訓(xùn):不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
H-2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
38C-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER細胞、HT-3細胞、U343細胞
Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞
MPC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞
HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
UMUC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞
SKM-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細胞系
GLC-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞
H-2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞
AR41P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞
AR41P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞
EAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
HMO6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
HMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
Hs737T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
QBI-HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞
P3J HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
TCC-PAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
H-847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
ECC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
MCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
38C13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
U-937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞
BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
U-138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
RIN m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
L929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
RKO-AS45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞
SKM-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細胞系
MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
NCIH727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
3D4/21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞
TK 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
Tca-8113細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
C918細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞
TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-4細胞、TMD-8細胞、RMa-bm細胞
IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、BALL1細胞、L cell line細胞
NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TI-73細胞、H-1672細胞、GM03570細胞
"