"NCI-H2141 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2141 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
KYSE-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
細胞傳代方法：３-４天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞
HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
HCC-1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
細胞生長特性：懸浮生長
NCI-H2141 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：聚團懸浮
養(yǎng)了幾年細胞，說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法：１)培養(yǎng)細胞前，可以看看細胞特點說明書，包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細胞，就得細心呵護了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況；４)凍存細胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細胞的教訓：不能偷懶!細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。１)不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。
251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
MMVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
NCIH1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
NCI.H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
PC-3M 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
EAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞
HSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61 5.3細胞、HLMVEC細胞、HT1376細胞
Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
SNUC2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
NCI-H2141 Adherent人小細胞肺癌細胞系
EFM-192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞
SK RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞
PL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞
PL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞
Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
HEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
HIT clone T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
UACC812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
WEHI-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞
639-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
Hs706T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR786細胞、JC細胞、Panc02細胞
PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
KAT5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞
Colo320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
NTERA2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞
EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
PIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞
J 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
MDA468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
KPNRTBM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone3細胞、H 9細胞、CP-70細胞
CAL39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞
T.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
HMCB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞
ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
UWB1.289+BRCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞
RIN m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞
U-118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
Hs 888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
L-5178-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
RPMI 1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞
X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞
no.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞
PF382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
SPC-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
NCI-H2141 Adherent人小細胞肺癌細胞系
H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
MONO-MAC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
SNU1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞
OVCAR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
BNL.CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
H-2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細胞、HEK 293-H細胞、NCIH1993細胞
NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細胞、A549/DDP細胞、2008細胞
SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
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