"NCI-H196 Adherent人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學(xué)實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H196 Adherent人肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
NFHIOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
GL-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞
87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
細胞傳代方法：１：４-１：６傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ACC-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞
Wistar Institute-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞
GM15452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCI-H196 Adherent人肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。
YTMLC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞
SF767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP70細胞、TE14細胞、KE 37細胞
CAL148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
RA 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞
NCI-H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
HcaF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
NCC-IT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞
H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
MUS-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
NCI-H196 Adherent人肺癌細胞系
SNU620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細胞、MARC-145細胞、HCC0827細胞
HK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
CT-26 WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞
H-2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞
Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
NCIH1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞
NCI-H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82細胞、CPAE細胞、A-427細胞
H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
NCIH2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞
U-138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
SUIT 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞
SNU387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
A10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
HCC2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
HEL-92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞
U-266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞
H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞
no-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
EAC-E2G8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
C 643細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞
CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
PK136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS60細胞、Vero-76細胞、Institute for Medical Research-90細胞
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
SKRC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
Panc-8_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細胞、KMST6細胞、NCIH838細胞
KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
H4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞
SUDHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
Tj-905細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
CCD841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 14細胞、Hep2細胞、Hs742T細胞
BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
COLO320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞
NCIH208細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
NCI-H196 Adherent人肺癌細胞系
IB-RS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1417細胞、MKN-45細胞、OUMS-23細胞
UM-UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞
RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
MES-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞
FHL124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
CCD-19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞
KP-N-RT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1563細胞、NBL-S細胞、RPMI 8226細胞
SCH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細胞、GOS3細胞、OVCA-420細胞
SF767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP70細胞、MNNG/HOS細胞、PK13細胞
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