"AHH-1 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
細胞背景資料：B淋巴細胞；EBV轉(zhuǎn)化
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
MCA-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞
BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
HEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
細胞生長：懸浮
AHH-1 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCC1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞
T HEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E-115細胞、NALM 6細胞、SHG-44細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
MDAMB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
SHSY-5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
AHH-1 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
L615細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
C33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
GLC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞
P3X63 AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33細胞、P-2003細胞、PANC-10-05細胞
LY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
BC-028細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞
Kit225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞
AHH-1 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
TERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞
RPMI-1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
TM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞
OVCA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
RGC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
NCI-H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞
MDA-MB-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
PA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
HeLa 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞
P3-Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
Colo-206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞
RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
L Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞
TE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
PANC.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞
HCC1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
MSTO211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞
C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
Hep 3B2.1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞
MV4II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
KU-812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
WC00059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
OVCAR-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞
GM16136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
BNL CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
FRTL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
HCC-1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞
NRK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
16HBE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
SNUC2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
UPCI-SCC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞
R2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細胞、SW-620細胞、HOP-92細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
NB.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞
AHH-1 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3-HeLa細胞、KYSE-140細胞、MDAMB415細胞
BI-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細胞、Human Liver-7702細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞
H2052_MM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-368細胞、YES2細胞、COLO-320DM細胞
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