"NKM-1 Lymphoblastoid cells人白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：急性髓系白血病；男性
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō)，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴(lài)殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
HAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、A-72細(xì)胞、DU4475細(xì)胞
HMEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain V細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、H1184細(xì)胞
RCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
NKM-1 Lymphoblastoid cells人白血病細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
H-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143BTK-細(xì)胞、LN 229細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞
SW 579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞
CEMC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞
NCL-H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM13細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞
H-2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細(xì)胞、RL-952細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NKM-1 Lymphoblastoid cells人白血病細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
MDA435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、JEG3細(xì)胞
NCIH209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-5細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、VE細(xì)胞
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
MC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞
EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞
Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞
MT-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNAS細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
NKM-1 Lymphoblastoid cells人白血病細(xì)胞系
SW480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAEpiC細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞、TK-1細(xì)胞
IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞
P31/Fujioka細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、D562細(xì)胞
BOWES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 24細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞
HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞
C3H/10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞
C3H/10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞
Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞
AU-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞
alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞
NCC-IT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
Jurkat77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、H766T細(xì)胞
M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-1細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
Hx147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：343 MG細(xì)胞、BJAB細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞
NFS 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞
HCC-1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、HOCF細(xì)胞
SP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1095Sk細(xì)胞、SW 13細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞
CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-358細(xì)胞、SKM-1細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞
CCRF-CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1301細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞、Alexander細(xì)胞
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
KP-N-RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-116細(xì)胞、190PT細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞
LCLC-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞
293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-IE8細(xì)胞、JIII細(xì)胞、C8161細(xì)胞
Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞
Panc 02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞
GL-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞
SUDHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M (TK-)細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞、NCTC929細(xì)胞
MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞
DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞
Panc8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04680細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞
JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞
HUT-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-815細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞
HDSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPsm細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞
HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
HSC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞
BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 19細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞、SCC25細(xì)胞
HCC941122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1963細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、H-1793細(xì)胞
HPAF/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
EFM-192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H524細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞
746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞
Helacyton gartleri細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細(xì)胞、VP229細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞
U266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4-11細(xì)胞、H1993細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞
MOVAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細(xì)胞、KHYG細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞
SW-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細(xì)胞、RH35細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞
NKM-1 Lymphoblastoid cells人白血病細(xì)胞系
MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞
MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKAC1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞
KMS26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kuramochi細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
NCIH209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-5細(xì)胞、H-2073細(xì)胞、HUC細(xì)胞
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