"Ku812F Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細胞系
細胞背景資料：慢性粒細胞白血病；男性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
UACC 893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
H-1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞
細胞生長：懸浮
Ku812F Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
L6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
HT-1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
NH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Ku812F Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
SNU423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞
COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
D324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
SNU216細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
Ku812F Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細胞系
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
GM03569D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
TE-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞
HNTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
HNTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
F9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
639-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
PC-9S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
SW 1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞
NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
GM05372細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞
BALB/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573細胞、HEL 92.1.7細胞、T9細胞
Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
DLD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
PC-3M 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
BEL-7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞
OC 316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539 BT細胞、Nittby-Salford 1細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞
OE-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
Eph4 1424細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDMEC細胞、RBMVEC細胞、LC-2-Ad細胞
293c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
RL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞
EBNA-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞
BHP-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
WM 239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細胞、DLD-1細胞、HCT8細胞
Clone Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
LL/2(LLc1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細胞、MDA-MB-361細胞、SW 1463細胞
MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
HT115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
L- cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
MMVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
LAPC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞
SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
HCC1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
P3-Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
BLO 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
Ku812F Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細胞系
NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細胞、TEC細胞、OVCA433細胞
786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細胞、SNB.19細胞、H810細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細胞、MHHCALL2細胞、MV4II細胞
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