"PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
TALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞
T/G HA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
細胞生長：懸浮
PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴細胞瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２傳代
K562/ADP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞
HNE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞
C22 (Clara)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
MS-751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴細胞瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
HCC1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞
Danio rerio Gill細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞
COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
Hs832T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
KHYG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
32D:cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞
PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴細胞瘤細胞系
NT2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
ssMCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
J82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細胞、SW-480細胞、CAKI 1細胞
HCC1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
CWR22Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
CWR22Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞
OKa-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞
HT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
PK136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS60細胞、Vero-76細胞、Institute for Medical Research-90細胞
A253細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞
C4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞
MCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞
HEK;293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞
HEK 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
A9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1688細胞、H-1573細胞、A-10細胞
CEM-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
AML 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞
COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞
Psi2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
H-1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
NCI-H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
TE-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞
Ca-Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
TNC-1B12B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞
H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
CHO-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
C6661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
MX1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BXPC3細胞、ASH-3細胞、Lu-65細胞
JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
NCI-H1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
SK-GT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
REC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞
Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
PF-382 Lymphoblastoid cells人T淋巴細胞瘤細胞系
KYSE30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7/WT細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、HCA7細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751細胞、BC-024細胞、EA. hy 926細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細胞、H2591細胞、MILE SVEN1細胞
Danio rerio Gill細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-3a細胞、HCC-2108細胞、DHL-5細胞
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