"SUP-B15 Lymphoblastoid cells人Ph+急淋白血病細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! RPE1-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞 MKN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞 HEK-293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞 細胞生長:懸浮 SUP-B15 Lymphoblastoid cells人Ph+急淋白血病細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2傳代。3天內(nèi)可長滿。 HEL 92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞 TC-1 [Mouse lung]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞 PNT1/A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞 H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞 NCI-H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA-7細胞、Ca9-22細胞、BIC-1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SUP-B15 Lymphoblastoid cells人Ph+急淋白血病細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞 VM-CUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC4細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞、SW-948細胞 OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞 D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞 LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞 CTLL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞 Rat 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞 BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞 293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞 HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞 SUP-B15 Lymphoblastoid cells人Ph+急淋白血病細胞系 LMTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞 CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞 Hs 578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞 UWB1-289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞 TE-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞 HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞 HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞 ChaGo-K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞 MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞 H-1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞 CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞 BNL CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞 OVCAR.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞 NCI-SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞 REC 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞 NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞 H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞 PTK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞 L5178YR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞 EC-GI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞 NCI-H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細胞、COLO206F細胞、K422細胞 HT 1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞 NuTu-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞 LS 174 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞 MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞 BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞 NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞 Malme-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞 PL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞 9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞 E304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞 BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞 HGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞 OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞 IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞 alpha TC1 clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞 HUT28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞 H.Ep. #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞 H.Ep. #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞 RMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞 NCM-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞 451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞 LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞 H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞 Mel-624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞 CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞 Hca-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞 BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞 P3-X63-Ag 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1618細胞、NBLS細胞、TGW細胞 HECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞 NPA'87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞 SUP-B15 Lymphoblastoid cells人Ph+急淋白血病細胞系 HFL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞 C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、KU19-19細胞 PF382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5 Cl 2細胞、Hs863T細胞、MOLT4細胞 OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細胞、RBL細胞、A549/DDP細胞 "
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