"SLK epithelioid cells卡波西肉瘤細胞系 細胞背景資料:肉瘤 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 F98細胞系相關產(chǎn)品:MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞 MDA MB 361細胞系相關產(chǎn)品:H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞 NCIH187細胞系相關產(chǎn)品:J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞 細胞生長:貼壁 SLK epithelioid cells卡波西肉瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SW 1116細胞系相關產(chǎn)品:WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞 MC-3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品:NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞 VK-2/E6E7細胞系相關產(chǎn)品:HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞 QG-56細胞系相關產(chǎn)品:SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞 HCS2/8細胞系相關產(chǎn)品:SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SLK epithelioid cells卡波西肉瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! IGR-OV1細胞系相關產(chǎn)品:H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞 HT144mel細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞 Chang Cells細胞系相關產(chǎn)品:Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞 NOMO1細胞系相關產(chǎn)品:Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞 H28細胞系相關產(chǎn)品:H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞 NCI-SNU-668細胞系相關產(chǎn)品:B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞 NCIH716細胞系相關產(chǎn)品:GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞 DC 2.4細胞系相關產(chǎn)品:526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞 Molm14細胞系相關產(chǎn)品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞 Hela-Ap-1細胞系相關產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞 SLK epithelioid cells卡波西肉瘤細胞系 GBC-SD細胞系相關產(chǎn)品:Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞 QGY-7703細胞系相關產(chǎn)品:FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞 SW48細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞 LLCMK2細胞系相關產(chǎn)品:L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞 H-345細胞系相關產(chǎn)品:V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞 CT 26細胞系相關產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞 CT 26細胞系相關產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞 SNU354細胞系相關產(chǎn)品:NCI522細胞、PK (15)細胞、BN-CL2細胞 DI TNC1細胞系相關產(chǎn)品:H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞 HLEC-B3細胞系相關產(chǎn)品:MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞 LLC-WRC 256細胞系相關產(chǎn)品:HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞 GM00637細胞系相關產(chǎn)品:KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞 C3H 10T1/2細胞系相關產(chǎn)品:CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞 MDA453細胞系相關產(chǎn)品:EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞 KYSE0520細胞系相關產(chǎn)品:Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞 MUTZ-1細胞系相關產(chǎn)品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞 SGC7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品:MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞 Tu177細胞系相關產(chǎn)品:CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞 CCD19Lu細胞系相關產(chǎn)品:Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞 UT-7細胞系相關產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞 HEK 293FT細胞系相關產(chǎn)品:CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞 BS-C-1細胞系相關產(chǎn)品:U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞 WM266-4細胞系相關產(chǎn)品:MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞 Saos2細胞系相關產(chǎn)品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞 H-1436細胞系相關產(chǎn)品:PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞 NCIADR.RES細胞系相關產(chǎn)品:SUNE 1細胞、SU-DHL-5細胞、3LL細胞 H125細胞系相關產(chǎn)品:MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞 HTh-74細胞系相關產(chǎn)品:Mel-MeWo細胞、HSC-I細胞、YD-15細胞 32D clone3細胞系相關產(chǎn)品:A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞 NCI-SNU-5細胞系相關產(chǎn)品:HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞 HFT 8810細胞系相關產(chǎn)品:CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞 NCI-H1694細胞系相關產(chǎn)品:H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞 PL-5細胞系相關產(chǎn)品:CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞 MHCC97-L細胞系相關產(chǎn)品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞 H322細胞系相關產(chǎn)品:P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞 MOLT3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞 SKLMS1細胞系相關產(chǎn)品:SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞 SV40-HCEC細胞系相關產(chǎn)品:IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞 SV40-HCEC細胞系相關產(chǎn)品:IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞 HS-294細胞系相關產(chǎn)品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞 SKCO-1細胞系相關產(chǎn)品:FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞 UWB1-289細胞系相關產(chǎn)品:A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞 TO175T細胞系相關產(chǎn)品:CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞 Mo7e細胞系相關產(chǎn)品:H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞 PC-3M IE8細胞系相關產(chǎn)品:Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞 THP-1(ATCC)細胞系相關產(chǎn)品:J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞 Case 3細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞 U-251MG細胞系相關產(chǎn)品:SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞 293細胞系相關產(chǎn)品:NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞 SW480E細胞系相關產(chǎn)品:MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞 AMO1細胞系相關產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞 SLK epithelioid cells卡波西肉瘤細胞系 HCEC-B4G12細胞系相關產(chǎn)品:AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞 CCD 966 SK細胞系相關產(chǎn)品:A2780 CP70細胞、NCI-157細胞、PC3M-1E8細胞 STC-1細胞系相關產(chǎn)品:Tu-686細胞、PASMCS細胞、CHO-Lec1細胞 Chang Cells細胞系相關產(chǎn)品:Z138細胞、H-1373細胞、JURKAT E-61細胞 "
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