"MC/9 epithelioid cells小鼠肥大細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:肥大細(xì)胞;C57BL/6 x A/J 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! TI-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2.1-7細(xì)胞、KS-SLK細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞 PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY5Y細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞 C6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細(xì)胞、GNM細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 MC/9 epithelioid cells小鼠肥大細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞 CMK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411細(xì)胞、CV-1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞 LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞 TE10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79-4細(xì)胞、GM12878細(xì)胞、MPC5細(xì)胞 ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MC/9 epithelioid cells小鼠肥大細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:懸浮 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞 NS-20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF CEM細(xì)胞、VK2細(xì)胞、U2932細(xì)胞 MARC145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞 RPVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞 SKRC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1155細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞 C3H10T1-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-1細(xì)胞、BT 325細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞 HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞 RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞 OVCAR.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2052細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞 Hepa 1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞 MC/9 epithelioid cells小鼠肥大細(xì)胞系 EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞 PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞 L 363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3B細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞、LU451細(xì)胞 CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞 MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞 MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞 MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞 NCI-H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/FUJ細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞、HHUA細(xì)胞 S.B.細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7402細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞、DU 145細(xì)胞 RKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451Lu細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞、HSC(Human Schwann)細(xì)胞 QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞 MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞 JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞 GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞 NPA87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU 145細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞 BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞 UCH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10RGB細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞、H1944細(xì)胞 CT26.CL25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-435細(xì)胞、H-64細(xì)胞、H2122細(xì)胞 Monomac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2228細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞、SUM190細(xì)胞 HCC0038細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞、J-774細(xì)胞 PL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞 Hs-611-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-202細(xì)胞、H-1618細(xì)胞、Sol8細(xì)胞 HOS (TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞 NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞 Panc 8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3H-1細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞 H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞 AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞 U20S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP-293細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞 TPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞 S-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs578Bst細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞 WEHI231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN6細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞 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