"ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質細胞系
細胞背景資料:基質;BALB/c
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
TM4細胞系相關產品:UC-3細胞、CWR22R-V1細胞、TE-11細胞
HS-294-T細胞系相關產品:HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
M4e細胞系相關產品:GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞
細胞生長:貼壁
ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質,應立即停用,更換另一批號的血清。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
TE671/RD細胞系相關產品:WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞
SNU-119細胞系相關產品:HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞
Hs-578-T細胞系相關產品:H2196細胞、OKa-C-1細胞、H-2228細胞
OVHM細胞系相關產品:MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞
PC12(高分化)細胞系相關產品:Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數,傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
BL6細胞系相關產品:UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
S3 HeLa細胞系相關產品:MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
WM 239-A細胞系相關產品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
P3-X63Ag8細胞系相關產品:HCC 2185細胞、Reuber H35細胞、H460細胞
SK_HEP1細胞系相關產品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
UM2細胞系相關產品:Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞
NCI H226細胞系相關產品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞
GM05887細胞系相關產品:RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞
R-1059-D細胞系相關產品:DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
MFE 296細胞系相關產品:SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質細胞系
SUPT-1細胞系相關產品:RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
H-1688細胞系相關產品:MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
Hs940T細胞系相關產品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關產品:Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
CHO K1細胞系相關產品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
GLAG-66細胞系相關產品:Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
GLAG-66細胞系相關產品:Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
SBC-3細胞系相關產品:HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關產品:YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
MOPC細胞系相關產品:HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
SKNFI細胞系相關產品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
CHP100細胞系相關產品:NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
A-673細胞系相關產品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
Hs 746.T細胞系相關產品:SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
RAEC細胞系相關產品:HCC2279細胞、NCIH2122細胞、HM06.A1細胞
HCC-2108細胞系相關產品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
X63Ag8-653細胞系相關產品:HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
HMC-1細胞系相關產品:ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
OVCAR8細胞系相關產品:RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
MPC11細胞系相關產品:GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞
HLF細胞系相關產品:HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
K7M2 wt細胞系相關產品:Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
COLO-205細胞系相關產品:NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
NHA細胞系相關產品:MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞系相關產品:NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞
Hs 888.T細胞系相關產品:SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
GalK 1細胞系相關產品:Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
SNU1040細胞系相關產品:16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞
H22-H8D8細胞系相關產品:CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
HFB細胞系相關產品:SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
NCIH1693細胞系相關產品:C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞
LP-1細胞系相關產品:KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
NCI H23細胞系相關產品:H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
CD18細胞系相關產品:LUDLU 1細胞、MARC-145細胞、HCC0827細胞
SK-N-MC細胞系相關產品:Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
16HBEo-細胞系相關產品:NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
T2(174 x CEM.T2)細胞系相關產品:PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞
HS-683細胞系相關產品:HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
SW-982細胞系相關產品:LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞
Karpas 299細胞系相關產品:HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞
NCI-H727細胞系相關產品:T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
C8166-CD4細胞系相關產品:KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
U138MG細胞系相關產品:HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
P388.D1細胞系相關產品:SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞
LTEP-sm 1細胞系相關產品:Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞
NFS-60細胞系相關產品:Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞
SKNAS細胞系相關產品:SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關產品:18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞
HLF-a細胞系相關產品:TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
RC-2細胞系相關產品:HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質細胞系
HT29細胞系相關產品:SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞
SUD-4細胞系相關產品:CHOK1細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
786-O RCC細胞系相關產品:SMA 560細胞、OVCAR-10細胞、ONS76細胞
WM 239-A細胞系相關產品:BCP1細胞、Strain L-929細胞、OV-1063細胞
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關鍵字: ST2 epithelioid cells小鼠骨髓基質細胞系
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