"HCe-8693 epithelioid cells人盲腸腺癌細胞系 細胞背景資料:盲腸腺癌;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 VMCUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞 DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞 CTLA4 Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1-sq細胞、LC-2/ad細胞、253JB-V細胞 細胞生長:貼壁 HCe-8693 epithelioid cells人盲腸腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞 U266B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞 HMEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞 LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞 MDA436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HCe-8693 epithelioid cells人盲腸腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞 A-375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞 Hs683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞 MOLM16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞 MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞 H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞 WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞 IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞 TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞 Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞 HCe-8693 epithelioid cells人盲腸腺癌細胞系 Caki-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞 KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞 SW260細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-10細胞、PLMVEC細胞、PG-4(S+L-)細胞 JVM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞 SNU484細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞 RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞 RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞 HMEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞 Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞 SK BR 03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞 HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞 SCC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞 H-1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞 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