"PC-3M epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞 BSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞 High-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞 細胞生長:貼壁 PC-3M epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2傳代 MCCAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞 Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞 COLO678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞 PA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 PC-3M epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 STTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞 BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞 HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞 A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞 BJA-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞 MDA-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞 BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞 NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞 COS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞 MeSoTheliOma-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞 PC-3M epithelioid cells人前列腺癌細胞系 PA-TU S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞 Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞 SCL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞 RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞 EL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞 H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞 H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞 GM2131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞 HO-1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PGLH7細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、HUSMC細胞 McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞 HNTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞 WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞 TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞 CTV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞 SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞 TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞 CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞 HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞 LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞 HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞 Vx2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞 Panc5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞 IGR-OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞 MDA-MB-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞 D-341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞 IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞 J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞 CL40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞 hRPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞 KASUMI6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1435細胞、OCI/AML-3細胞、RMG1細胞 HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞 OC 316細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-539 BT細胞、Nittby-Salford 1細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞 PK136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS60細胞、Vero-76細胞、Institute for Medical Research-90細胞 4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞 BIU87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2591細胞、NCI-H358細胞、HSAEC1-KT細胞 2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞 COLO 357細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞 CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞 CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞 AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞 SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞 MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞 MDA.MB.231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞 MonoMac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞 E.G7-OVA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞 RKO-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞 LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞 OSC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞 COLO824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細胞、G422細胞、H146細胞 RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞 VP229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞 PC-3M epithelioid cells人前列腺癌細胞系 MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞 GCT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL-3A細胞、P3/ag細胞、HEK-293F細胞 H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細胞、NSH細胞、Rat 1細胞 HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細胞、Hep2細胞、Earles's cells細胞 "
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