"SCC-15 epithelioid cells人鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! LAPC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSAT細(xì)胞、SNU886細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞 NCIH2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞 Wien133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-CL-11細(xì)胞、BALL1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 SCC-15 epithelioid cells人鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:4-1:8?jìng)鞔?3天換液1次。 SuperTube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1930細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞、LM6細(xì)胞 H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞 MUG-Chor1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1.Lu細(xì)胞、L細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞 H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞 FHs74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SCC-15 epithelioid cells人鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 RBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-C4-2細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞 C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞 TALL-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞 SKNO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞 HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞 BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL148細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞、PL 45細(xì)胞 RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞 OCI-AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-6.1細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞 MC57細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、NPA細(xì)胞 MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞 SCC-15 epithelioid cells人鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系 H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞 McARH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADR.RES細(xì)胞、MRCV細(xì)胞、MASMC細(xì)胞 Huh-7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-H細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞、MA104細(xì)胞 VB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H526細(xì)胞、H-2452細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞 Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞 GP2-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM38細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞 H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1143細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞 SW.620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-215細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞 aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞 HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞 PTK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞、MuM-2B細(xì)胞 SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞 FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞 NPC-TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pfeiffer細(xì)胞、H1770細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞 CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞 Dami細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1954細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞 SK-ES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18/HPAF細(xì)胞、GCT細(xì)胞、N87細(xì)胞 H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞 T-CAM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞、H1993細(xì)胞 HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞 32D.cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞、QBC939細(xì)胞 4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞 PCI-SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1376細(xì)胞、DU-145細(xì)胞、DF1細(xì)胞 AR4IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞 YT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞 OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞 CCD33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞 SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞 Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞 Human Epithelioma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細(xì)胞、SNK6細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞 hOMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy ori 3.1細(xì)胞、JM-1細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞 SC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1105細(xì)胞、3AO細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞 CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞 IBRS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞 U87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC1005細(xì)胞、ECC10細(xì)胞、RCM1細(xì)胞 HSAS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞 KAT-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞 beta-TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCPAP細(xì)胞、TE3細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞 Tb1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞 HEK;293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954 BL細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞 KU 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9 (Hamprecht)細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞 CCRF/CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞 WSU-DLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞 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