"LK2 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
細胞背景資料：肺鱗癌；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
PCI-SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1376細胞、DU-145細胞、DF1細胞
HBZY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞
H-2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
細胞生長：貼壁
LK2 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Dunn LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞
KYSE-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞
HCASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
BNL CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞
293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
LK2 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
HPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-3細胞、H2198細胞、YES2細胞
PAa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
PANC-04-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-83細胞、ADR-RES細胞、H-II-E-C3細胞
293/EBNA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞
OV1/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
LK2 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
NSC-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
MeT 5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞
CAL-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
DLD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
Swiss3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
58F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
58F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
SW-480細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H78細胞、MSB-1細胞、BALL-1細胞
KYSE30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7/WT細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、HCA7細胞
OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
NCI-H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
KCL22S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞
SW13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞
Okayama University Medical School-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞
Hos TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
HCEC-B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞
NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞
HEL-92_1_7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
CAL 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞
FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
TGW-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞
HEK-293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞
HCC1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
U2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
MGc80-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞
TE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
SKG-3a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞
OV1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-30細胞、Colon38細胞、KMS-18細胞
JROECL 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
SW-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
IOSE80UBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞
LN229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞
CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
PA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞
NK92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
Co320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞
OCI-Ly 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞
HCT-GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞
H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
LK2 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
Kato-III細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
GM07404D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1838細胞、33604細胞、NCI-H250細胞
H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細胞、SW-1463細胞、KM12SM細胞
HP615細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 8.13細胞、CFSC-8B細胞、LTEPsm細胞
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