"T84 epithelioid cells人結腸腺癌肺轉移細胞系 細胞背景資料:T84細胞株是從一位72歲男性結腸癌患者的肺轉移灶建立的可移植人類癌細胞株。 腫瘤組織皮下接種于BALB/c裸鼠,并連續(xù)進行移植。 [26072] 在裸鼠身上的移植過程中,細胞株始終保持結腸癌的原始組織性狀。 [26072] 在無胸腺小鼠中傳代23代后建立了T84細胞株。 這些細胞單層生長到飽和并在接觸細胞間展現出緊密連接和橋粒。 [1155] 有很多關于多肽類激素和神經遞質并維持定向電解質傳輸的受體。 [1155] 這株細胞展現了接觸細胞中的緊密連接和橋粒。 [1155] 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質,對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 H596細胞系相關產品:GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞 SF 126細胞系相關產品:B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞 JM1細胞系相關產品:MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞 細胞生長:貼壁 T84 epithelioid cells人結腸腺癌肺轉移細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周2次。 Bac12F5細胞系相關產品:RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞 HCC1937細胞系相關產品:JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞 SNU-398細胞系相關產品:NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞 LCD細胞系相關產品:NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞 GM00637B細胞系相關產品:Neukoplast細胞、L-M(TK-)細胞、alphaTC1 Clone 6細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 T84 epithelioid cells人結腸腺癌肺轉移細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞,多角 造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! HEK 293FT細胞系相關產品:CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞 RPMI-8402細胞系相關產品:SuperTube細胞、ABE8.1/2細胞、HDMEC細胞 HR-8348細胞系相關產品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞 CSQT-2細胞系相關產品:Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞 Normal Rat Kidney-49F細胞系相關產品:A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞 RSC 96細胞系相關產品:Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞 AMJ2C8細胞系相關產品:Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞 HIC細胞系相關產品:hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞 TE-671細胞系相關產品:LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞 MCF7-CTRL細胞系相關產品:SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞 T84 epithelioid cells人結腸腺癌肺轉移細胞系 MBT-2細胞系相關產品:HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞 RAW264.7細胞系相關產品:SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞 KYSE140細胞系相關產品:H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞 T47D:A細胞系相關產品:PL-45細胞、FLC7細胞、OACP4 C細胞 CCD33Co細胞系相關產品:T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞 HBZY 1細胞系相關產品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞 HBZY 1細胞系相關產品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞 PLA-801C細胞系相關產品:FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞 H1755細胞系相關產品:Panc_04_03細胞、ME180細胞、MDAPCa-2b細胞 TE 85 ClF-5細胞系相關產品:IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞 SNU520細胞系相關產品:H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞 SW 579細胞系相關產品:ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞 AMO1細胞系相關產品:RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞 NCIH596細胞系相關產品:Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞 COLO357細胞系相關產品:NCI-H810細胞、WM-239-A細胞、Anip-973細胞 KHYG1細胞系相關產品:no-11細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、P30OHK細胞 H-838細胞系相關產品:CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞 LS123細胞系相關產品:HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞 KY-50細胞系相關產品:CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞 Malme-3M細胞系相關產品:NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞 Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關產品:ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞 H1975細胞系相關產品:GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞 HCT/FU細胞系相關產品:Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞 MAVER1細胞系相關產品:SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞 RPMC細胞系相關產品:RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞 HO-8910 PM細胞系相關產品:CL-40細胞、H-2227細胞、NCI-H345細胞 G-401細胞系相關產品:NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞 451Lu細胞系相關產品:NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞 GM06141細胞系相關產品:RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞 KMST-6細胞系相關產品:DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞 NCIH2291細胞系相關產品:Mouse Colon 38細胞、WB F344細胞、KE37細胞 BMF細胞系相關產品:TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞 SPC-A1細胞系相關產品:H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞 MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關產品:SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞 Cor L51細胞系相關產品:NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞 HuH-6細胞系相關產品:CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞 NCI-SNU-C2A細胞系相關產品:SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞 Okayama University Medical School-23細胞系相關產品:OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞 BMSCs(mBMSCs)細胞系相關產品:U-2OS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞 NCIH1838細胞系相關產品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞 Panc02.03細胞系相關產品:H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞 Line 207細胞系相關產品:HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞 J 82細胞系相關產品:RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞 SW 1417細胞系相關產品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞 BT 549細胞系相關產品:DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞 373 MG細胞系相關產品:OEC19細胞、MAVER1細胞、NCIH295R細胞 MDA361細胞系相關產品:HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞 KP-N-RT-BM細胞系相關產品:HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞 118MG細胞系相關產品:SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞 OVCAR 420細胞系相關產品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞 Hs 888Lu細胞系相關產品:Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞 T84 epithelioid cells人結腸腺癌肺轉移細胞系 T/GHA-VSMC細胞系相關產品:SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞 A204細胞系相關產品:HuT 102細胞、H1155細胞、NCI-460細胞 SP-2細胞系相關產品:FBHE細胞、GM00215A細胞、Neuro 2a細胞 HR8348細胞系相關產品:DHL10細胞、QGY7701細胞、293-FT細胞 "
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