"SK-CO-1 epithelioid cells人結直腸腺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞來源于結直腸病人的轉移性腹水。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
TE-3A細胞系相關產品：COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
CHO-Lec1細胞系相關產品：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞
HD-LM-2細胞系相關產品：EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞
細胞生長：貼壁
SK-CO-1 epithelioid cells人結直腸腺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代，每周２-３次。
MDAMB415細胞系相關產品：293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞
SKO3細胞系相關產品：143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
IEC 6細胞系相關產品：NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
WI-38細胞系相關產品：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
5-8F細胞系相關產品：Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
SK-CO-1 epithelioid cells人結直腸腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數，傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
A-172 MG細胞系相關產品：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
CEM/0細胞系相關產品：NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
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SK-CO-1 epithelioid cells人結直腸腺癌細胞系
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NUGC4細胞系相關產品：HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞
SJ-RH30細胞系相關產品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
EA.hy 926細胞系相關產品：RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
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HOK細胞系相關產品：T98 G細胞、HSC-2細胞、SW962細胞
NIH:OVCAR4細胞系相關產品：Ly8細胞、CHL-1細胞、DK-MG細胞
SJ-RH30細胞系相關產品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
CHO Lec1細胞系相關產品：Caco-2/BBe細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、A375S2細胞
DrG細胞系相關產品：H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
WEHI 164細胞系相關產品：HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞
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SKCol1細胞系相關產品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
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NCI-H1954細胞系相關產品：TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞
EBTr細胞系相關產品：RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞
NCI-H747細胞系相關產品：C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關產品：QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞
HUT28細胞系相關產品：COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞
BC-021細胞系相關產品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞
TE 85.T細胞系相關產品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
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A101D細胞系相關產品：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞
FU-OV-1細胞系相關產品：NCIH526細胞、MDA-MB-231-GFP細胞、U-CH1細胞
NCIH650細胞系相關產品：K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
Hopkins-92細胞系相關產品：SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞
95C細胞系相關產品：BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞
PANC-28細胞系相關產品：CHAGOK1細胞、NCI-H510A細胞、H-EMC-SS細胞
MGC-803細胞系相關產品：NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
H87細胞系相關產品：LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
NCIH1573細胞系相關產品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
NS-1細胞系相關產品：MADB 106細胞、MLOY4細胞、KYSE-140細胞
SK-CO-1 epithelioid cells人結直腸腺癌細胞系
HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關產品：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產品：N1S1細胞、HET1A細胞、L-428細胞
NUGC-2細胞系相關產品：LNCaP C4-2細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、PL-12細胞
K 562細胞系相關產品：Walker/LLC-WRC 256細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、SNU16細胞
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