"Daoy epithelioid cells人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
TOV-21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細(xì)胞、H865細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞
X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細(xì)胞、H-196細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞
NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
Daoy epithelioid cells人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測，而且它對細(xì)胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來講，對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞傳代方法：１：４-１：６傳代；每周換液２-３次。
KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞
Mia PACA 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞、DHL10細(xì)胞
QBI-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G401細(xì)胞、C33-A細(xì)胞、Hs729細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Daoy epithelioid cells人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性：多邊形
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
SUM-159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1341細(xì)胞、HS5細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
HHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞
SuDHL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細(xì)胞、LS-411細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞
HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞
GM00637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0410細(xì)胞、H847細(xì)胞、CTSC-3細(xì)胞
MT-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNAS細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞
H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-6細(xì)胞、H841細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞
Hep 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞
A-375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-229細(xì)胞、H35細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞
Daoy epithelioid cells人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
HB611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞
HT(H9)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
COR-L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C26細(xì)胞、MC/9細(xì)胞、LM8細(xì)胞
NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞
NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
Hi-five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞
ECC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10細(xì)胞、SCL1細(xì)胞、Lec1細(xì)胞
LAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC 7901細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kupffer細(xì)胞、Y1細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞
BNL-HCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞
MA104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS-76細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、HSC1細(xì)胞
Tb 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.10A細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞、NHRF細(xì)胞
AR41P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞
SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
HPDE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC2細(xì)胞、CTSC-3細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞
SK-Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞
GM17219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞
NCIH1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-1細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞、SW-403細(xì)胞
RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細(xì)胞、HPDE細(xì)胞、OKT3細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞、RC13細(xì)胞
OVCA 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞、H-1944細(xì)胞
Y3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞
B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI6666細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞、ASH3細(xì)胞
NCIH841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞
Helacyton gartleri細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細(xì)胞、VP229細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞
TPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞
SK-N-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP-1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞、CCRF細(xì)胞
PGLH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-11細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞
MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞
CG4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞
OC316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞
EFM192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-394細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞
HL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EM-3細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞
SUIT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRMECs細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
CCF-STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2J細(xì)胞、ME 180細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
HCC0038細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞、J-774細(xì)胞
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞
Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3F442A細(xì)胞、A-549細(xì)胞、G401細(xì)胞
NALM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
BrCL18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞
Daoy epithelioid cells人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞
MCF-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
CA-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T15細(xì)胞、JB 6細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞
HHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞、B16F1細(xì)胞
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