"H4-II-E-C3 epithelioid cells大鼠肝癌細胞系 細胞背景資料:在糖皮質(zhì)激素、胰島素或cAMP衍生物的誘導(dǎo)下可以產(chǎn)生酪酸基轉(zhuǎn)移酶;可被逆轉(zhuǎn)錄病毒感染;可產(chǎn)生白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、凝血酶原;在AxC大鼠中可以成瘤。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 WEHI164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞 SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞 BrCL15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞 細胞生長:貼壁 H4-II-E-C3 epithelioid cells大鼠肝癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2傳代 RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞 WI-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞 Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞 HIT T-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞 RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 H4-II-E-C3 epithelioid cells大鼠肝癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞 SW 1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞 H-920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞 SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞 PNT1/A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞 MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞 U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞 NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞 RAMOS2G64C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞 NCI-SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞 H4-II-E-C3 epithelioid cells大鼠肝癌細胞系 MEF (CF-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞 AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞 SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞 SP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞 HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞 MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞 U373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞 MDAPCa2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3細胞、JM1細胞、Lieming Xu-2細胞 HSKMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞 H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞 HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞 L- cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞 NCI-H102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞 IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞 KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞 HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞 GT39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞 U-87MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞 NCIH1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1573細胞、OCIAML5細胞、MDCC-MSB1細胞 SK-MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞 NCI-H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞 EFM192細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL8細胞、Hs 578.Bst細胞、G-292, clone A141B1細胞 A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞 PanC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞 NCI-H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞 QGY7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞 CATHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞 L 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞 SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞 Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞 CEM-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞 Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞 J 111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞 OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞 SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞 HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞 CHO/dhFr-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞 C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞 HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞 MES-SA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞 MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞 BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞 PE CA PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞 TE 85 ClF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞 COV362細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞 SJRH 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞 SW-1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞 Rat 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞 LU-65M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞 H4-II-E-C3 epithelioid cells大鼠肝癌細胞系 INS1-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95D細胞、WEHI 3B細胞、COLO 699細胞 SCC VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細胞、L-Wnt-3A細胞、KNS42細胞 SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細胞、HCAEC細胞、B4G12細胞 H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細胞、Ca-Ski細胞、TCCSUP細胞 "
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