"BT-549 epithelioid cells人乳腺導管癌細胞系 細胞背景資料:該細胞1978年由W.G.Coutinho和E.Y.Lasfargues建系,源自一位72歲患有乳腺導管癌的白人女性,來源組織包括乳頭及浸潤導管。該細胞形態(tài)包括上皮樣細胞及多核巨細胞,可分泌一種粘性物質(zhì)。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! SCH細胞系相關產(chǎn)品:SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞 HeLa-229細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞 P3 88 D1細胞系相關產(chǎn)品:UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞 細胞生長:貼壁 BT-549 epithelioid cells人乳腺導管癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2傳代 H-28細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞 SNU-182細胞系相關產(chǎn)品:B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞 T. T細胞系相關產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞 MASMC細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞 HUV-EC-C細胞系相關產(chǎn)品:B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 BT-549 epithelioid cells人乳腺導管癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 SCL-2細胞系相關產(chǎn)品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞 P3-X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品:Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞 KU1919細胞系相關產(chǎn)品:MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞 HR1K細胞系相關產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞 OE19細胞系相關產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞 SW 780細胞系相關產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞 Kit225-K6細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞 OAW 42細胞系相關產(chǎn)品:RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞 hRPTC細胞系相關產(chǎn)品:PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞 NCIH441細胞系相關產(chǎn)品:ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞 BT-549 epithelioid cells人乳腺導管癌細胞系 CAL12T細胞系相關產(chǎn)品:L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞 SJSA細胞系相關產(chǎn)品:CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞 ECC-12細胞系相關產(chǎn)品:RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞 DLD 1細胞系相關產(chǎn)品:PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞 MDAMB361細胞系相關產(chǎn)品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞 D283MED細胞系相關產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞 D283MED細胞系相關產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞 HOS/MNNG細胞系相關產(chǎn)品:H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞 GM05887A細胞系相關產(chǎn)品:MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞 Caco-2 BBe細胞系相關產(chǎn)品:RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞 BC-024細胞系相關產(chǎn)品:MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞 GC-2細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞 NCI-SNU-761細胞系相關產(chǎn)品:293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞 OCI-LY-8細胞系相關產(chǎn)品:SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞 343 MG細胞系相關產(chǎn)品:SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞 HRPEpiC細胞系相關產(chǎn)品:HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞 Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關產(chǎn)品:KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞 MDA-1386細胞系相關產(chǎn)品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞 MHCCLM3細胞系相關產(chǎn)品:HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞 SCC25細胞系相關產(chǎn)品:Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞 H520細胞系相關產(chǎn)品:EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞 NCIH322細胞系相關產(chǎn)品:SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞 H1436細胞系相關產(chǎn)品:Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞 293 c18細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞 M-14細胞系相關產(chǎn)品:SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞 THP1細胞系相關產(chǎn)品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞 COLO320DM細胞系相關產(chǎn)品:GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞 Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞 EC109細胞系相關產(chǎn)品:Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞 hTERTHME1細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞 JTC-39細胞系相關產(chǎn)品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞 COS1細胞系相關產(chǎn)品:Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞 H-35細胞系相關產(chǎn)品:KP 4細胞、SUDHL2細胞、BSC1細胞 HCC-95細胞系相關產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞 SK-CO-1細胞系相關產(chǎn)品:H-1734細胞、NCI-H1437細胞、CV 1細胞 NTERA-2cl.D1細胞系相關產(chǎn)品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞 NCI/ADRRES細胞系相關產(chǎn)品:118 MG細胞、WiDr/S細胞、ACCM細胞 Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關產(chǎn)品:GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞 NCIH69細胞系相關產(chǎn)品:RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞 RK13細胞系相關產(chǎn)品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞 EFO-27細胞系相關產(chǎn)品:PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞 IHH細胞系相關產(chǎn)品:HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞 T-ALL 1細胞系相關產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞 SCL-I細胞系相關產(chǎn)品:WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞 COLO-680N細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞 RGM1細胞系相關產(chǎn)品:C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞 Hs 821.T細胞系相關產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞 L78細胞系相關產(chǎn)品:L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞 U251n細胞系相關產(chǎn)品:IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞 KCL-22細胞系相關產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞 MLE12細胞系相關產(chǎn)品:KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞 BT-549 epithelioid cells人乳腺導管癌細胞系 Hs 766細胞系相關產(chǎn)品:SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞 PK-13細胞系相關產(chǎn)品:PG-BE1細胞、CCRF-SB細胞、Psi-2 DAP細胞 P3X63 Ag8細胞系相關產(chǎn)品:H-2291細胞、KYSE 180細胞、FRH-0201細胞 KU19-19細胞系相關產(chǎn)品:LTEPa2細胞、CHP-126細胞、SW 1116細胞 "
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