"HCC827 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:這株細胞建于1994年三月。這株肺腺癌在EGFR酪酸激酶區(qū)域有一個獲得性突變(E746-A750缺失)?;颊咴冢玻禋q到26歲時每個月抽1包煙。在診斷前12年不再抽煙。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
MOLT16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞
CHP-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
細胞生長:貼壁
HCC827 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法:消化5分鐘。1:2。4-5天長滿。
RM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
OV-2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞
Y-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC827 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
ARO 81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
MNNGHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞
Tissue Culture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞
NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
SW 839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
OCI-Ly 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞
PTK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
OV-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞
HCC827 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系
KHYG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
PLC PRF 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞
RCK-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
BrCL18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
Hs 766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRVEC細胞、MDA MB 436細胞、WM-266-4細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
HK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
IM95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
OVCAR-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
SJSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
HCC-1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞
ECGI10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞
H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
RS4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞
Cor L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
FD-LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞
K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞
MKN7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
PLA802細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞
HCC1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
SiHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
NCTC-1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
KOSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
FTC-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
SF767細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780CP70細胞、TE14細胞、KE 37細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR20細胞、NK-92MI細胞、Hs 895.T細胞
MKN-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
Rat1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞
CA-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
PL45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
RGC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞
HT-55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞
102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
HCC827 epithelioid cells人非小細胞肺癌細胞系
JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
SCI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細胞、Chang Cells細胞、MLOY4細胞
R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細胞、SK RC 52細胞、DMS53細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細胞、MDA231細胞、Caco-2/BBe細胞
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