"6T-CEM Cell:人T細胞白血病細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
RN-c細胞系相關產品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
RMS13細胞系相關產品:WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
PLA-802細胞系相關產品:BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關產品:293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
6T-CEM Cell:人T細胞白血病細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現細胞生長中已經有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現,用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數,傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
A-20細胞系相關產品:EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關產品:NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
DAKIKI Clone 1細胞系相關產品:A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞
TSUpr1細胞系相關產品:SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
PC3M-1E8細胞系相關產品:CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
細胞生長特性:貼壁生長
6T-CEM Cell:人T細胞白血病細胞系
細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
TE3細胞系相關產品:HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
QGY-7701細胞系相關產品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
UCLA-SO-M21細胞系相關產品:NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關產品:MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
GA-10 (Clone 4)細胞系相關產品:JM細胞、CEM細胞、KMY1022細胞
CG-4細胞系相關產品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
451Lu細胞系相關產品:NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞
6T-CEM Cell:人T細胞白血病細胞系
AHH-1細胞系相關產品:Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞
MCF10-A細胞系相關產品:ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞
PANC0327細胞系相關產品:3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
3T3-A31細胞系相關產品:RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞
H-520細胞系相關產品:QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞
HAPI細胞系相關產品:ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞
NCI-H650細胞系相關產品:SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞
MonoMac1細胞系相關產品:HSC-3細胞、95C細胞、C38細胞
SUM52PE細胞系相關產品:AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
SUM52PE細胞系相關產品:AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
RIN-m 14B細胞系相關產品:SW-1783細胞、SHG44細胞、SupB15W細胞
JM1細胞系相關產品:MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
L615細胞系相關產品:GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
Mc Coy細胞系相關產品:FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
A549 ATCC細胞系相關產品:ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
A704細胞系相關產品:VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞
CZ-1細胞系相關產品:ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
NCIH69細胞系相關產品:RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞
NCI-H1299細胞系相關產品:COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
H1672細胞系相關產品:MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關產品:MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
SU-DHL-6細胞系相關產品:SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
SU86.86細胞系相關產品:NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
HRCEC細胞系相關產品:Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
H-446細胞系相關產品:U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
RCC-10RGB細胞系相關產品:Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
PL5細胞系相關產品:PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞
H2227細胞系相關產品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
ES2細胞系相關產品:OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞
HSC-6細胞系相關產品:PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
SHG-44細胞系相關產品:H4細胞、A253細胞、SF295細胞
GM04154細胞系相關產品:NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞
JM1細胞系相關產品:MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
HCC-70細胞系相關產品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
BJAB細胞系相關產品:COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
COLO201細胞系相關產品:Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞
MM1S細胞系相關產品:L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
B16/F1細胞系相關產品:H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
WPE-int細胞系相關產品:HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
MDAPC2B細胞系相關產品:M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞
HEC251細胞系相關產品:CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞
U373 MG細胞系相關產品:D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
OCI-AML-4細胞系相關產品:SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
6T-CEM Cell:人T細胞白血病細胞系
AG06814-J細胞系相關產品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關產品:SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
Raji細胞系相關產品:VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
PC-3M-2B4細胞系相關產品:GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
U-hth74細胞系相關產品:MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
SKMEL24細胞系相關產品:32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞
RBSMC細胞系相關產品:LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞
BIC-1細胞系相關產品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞
QGY-7701細胞系相關產品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
GBC-SD細胞系相關產品:Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
NS1/1-Ag4.1細胞系相關產品:JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞
OCI-AML-3細胞系相關產品:HS-294T細胞、VM Cub 1細胞、SVGp12細胞
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關鍵字: 6T-CEM Cell:人T細胞白血病細胞系
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