"F98 Cell:大鼠膠質(zhì)瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:惡性膠質(zhì)瘤;雌性;Fischer大鼠
KLM1細胞系相關產(chǎn)品:EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品:Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
624 MEL細胞系相關產(chǎn)品:SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
NCI/ADRRES細胞系相關產(chǎn)品:118 MG細胞、WiDr/S細胞、ACCM細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
F98 Cell:大鼠膠質(zhì)瘤細胞系
細胞消化過程總結:其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MeWo細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞
bEnd3細胞系相關產(chǎn)品:OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
SKNAS細胞系相關產(chǎn)品:SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
GM03570細胞系相關產(chǎn)品:Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞
NCI-H1703細胞系相關產(chǎn)品:LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
細胞生長特性:貼壁
F98 Cell:大鼠膠質(zhì)瘤細胞系
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
alpha TC1.6細胞系相關產(chǎn)品:HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞
SW948細胞系相關產(chǎn)品:CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
PLA802細胞系相關產(chǎn)品:CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
LNCaP C4-2細胞系相關產(chǎn)品:SW480E細胞、DI TNC-1細胞、NK92細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關產(chǎn)品:hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
293GP細胞系相關產(chǎn)品:BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
F98 Cell:大鼠膠質(zhì)瘤細胞系
GM07404細胞系相關產(chǎn)品:639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
786-O細胞系相關產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
CHP-100細胞系相關產(chǎn)品:PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
MIN-6細胞系相關產(chǎn)品:SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞
IMR32細胞系相關產(chǎn)品:Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
KALS-1細胞系相關產(chǎn)品:RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
V 79細胞系相關產(chǎn)品:Liver-02細胞、LS 123細胞、Microbiological Associates-104細胞
VMM5A細胞系相關產(chǎn)品:CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關產(chǎn)品:KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關產(chǎn)品:KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞
MDCK細胞系相關產(chǎn)品:SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞
SK-BR3細胞系相關產(chǎn)品:MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
NBL-5細胞系相關產(chǎn)品:RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞
P388細胞系相關產(chǎn)品:KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
OCI/AML2細胞系相關產(chǎn)品:BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
LA-795細胞系相關產(chǎn)品:NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
Y-1細胞系相關產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞
NCI-H2286細胞系相關產(chǎn)品:SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
CV-1細胞系相關產(chǎn)品:CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞
H-2196細胞系相關產(chǎn)品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
H-2196細胞系相關產(chǎn)品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
NCIH508細胞系相關產(chǎn)品:UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞
SK-N-BE2C細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
L78細胞系相關產(chǎn)品:L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
Hi5細胞系相關產(chǎn)品:JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
MB-49細胞系相關產(chǎn)品:HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞
COR-L23/P細胞系相關產(chǎn)品:RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
NMCG1細胞系相關產(chǎn)品:HBVSMC細胞、SaOS-2細胞、HEK-EBNA細胞
SK.OV.3細胞系相關產(chǎn)品:HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關產(chǎn)品:Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
OCI/AML3細胞系相關產(chǎn)品:hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
DMS273細胞系相關產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
D283-MED細胞系相關產(chǎn)品:MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞
RGCs細胞系相關產(chǎn)品:SK-MES-1細胞、C81-61細胞、3T6 Swiss Albino細胞
Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞
LAD2細胞系相關產(chǎn)品:IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞
MDA-MB436細胞系相關產(chǎn)品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
OCI Ly1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
143B細胞系相關產(chǎn)品:JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
143B細胞系相關產(chǎn)品:JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
Walker 256細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞
X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品:H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞
F98 Cell:大鼠膠質(zhì)瘤細胞系
Liver-02細胞系相關產(chǎn)品:MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
H-2227細胞系相關產(chǎn)品:HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞
bEnd3細胞系相關產(chǎn)品:OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
COLO-16細胞系相關產(chǎn)品:OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
VB細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞
H 9細胞系相關產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
A.704細胞系相關產(chǎn)品:HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
MKN28細胞系相關產(chǎn)品:TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
HIT-T15細胞系相關產(chǎn)品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
NCIH929細胞系相關產(chǎn)品:U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
HEC-1-A細胞系相關產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞
COLO-320HSR細胞系相關產(chǎn)品:UACC-812細胞、Hs 940.T細胞、CHP212細胞
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關鍵字: F98 Cell:大鼠膠質(zhì)瘤細胞系
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