"3T3-L1 Cell:小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞系
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：３T３-L１是從３T３細胞（Swissalbino）中經(jīng)克隆分離得到的連續(xù)傳代的亞系。該細胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態(tài)經(jīng)歷了前脂肪細胞到脂肪樣細胞的轉(zhuǎn)變。該細胞鼠痘病毒陰性；可產(chǎn)生甘油三酯，高濃度血清可增強細胞內(nèi)脂肪堆積。
HCC1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
BNL-CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
H-735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
3T3-L1 Cell:小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CFSC-2G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
NCIH889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
NCIH1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞
MC 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
細胞生長特性：貼壁生長
3T3-L1 Cell:小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣
RWPE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞
HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
GS-9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
3T3-L1 Cell:小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞系
KYSE410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
Hs 578.Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
HIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
L02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞
Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞
MDAMB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
UM-UC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞
OVSAHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-mel細胞、Hs683T細胞、UWB1.289+BRCA1細胞
OVSAHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-mel細胞、Hs683T細胞、UWB1.289+BRCA1細胞
Caco-2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞
UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
CEM-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞
MV(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
343 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞
J.E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞
BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
RT4P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2細胞、DMS153細胞、FRhK-4細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
NCI-H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞
TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
NCI-H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
SNU368細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
L428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
SKMel-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞
LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
HCC1171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
32Dc3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞、BE(2)M-17細胞
NPA87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
451-LU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞
3T3-L1 Cell:小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞系
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
B16/F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
Hela-mock細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
Hs863T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細胞、LC-1細胞、RDES-1細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
0V-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞
H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞
SU-DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
PECAPJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細胞、LAN5細胞、WERI-Rb1細胞
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