"MRC-5 Cell:人胚肺成纖維細胞系
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:MRC-5細胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織,該細胞老化前能傳代42~46個倍增時間。
GM03671細胞系相關產(chǎn)品:TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞
KMB17細胞系相關產(chǎn)品:Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞
A-204細胞系相關產(chǎn)品:COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
HPAF II細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MRC-5 Cell:人胚肺成纖維細胞系
細胞凍存基本方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:5傳代;每周1-2次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
IPEC-1細胞系相關產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
VMRC-RCZ細胞系相關產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
OVCA5細胞系相關產(chǎn)品:PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
HBZY 1細胞系相關產(chǎn)品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
Hs-343-T細胞系相關產(chǎn)品:FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞
細胞生長特性:貼壁生長
MRC-5 Cell:人胚肺成纖維細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣
BT-325細胞系相關產(chǎn)品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
KYSE-410細胞系相關產(chǎn)品:TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞
ME180細胞系相關產(chǎn)品:PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關產(chǎn)品:CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞
H-2444細胞系相關產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
SKNAS細胞系相關產(chǎn)品:SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
CAL-27細胞系相關產(chǎn)品:CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
MRC-5 Cell:人胚肺成纖維細胞系
OCI-LY-18細胞系相關產(chǎn)品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
X63-Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品:CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞
COLO-829細胞系相關產(chǎn)品:A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
ARO細胞系相關產(chǎn)品:2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
DHL6細胞系相關產(chǎn)品:KASUMI6細胞、C22細胞、LM(TK-)細胞
U373 MG細胞系相關產(chǎn)品:D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
MS751細胞系相關產(chǎn)品:INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞
Hs840T細胞系相關產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
REC1細胞系相關產(chǎn)品:MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞
REC1細胞系相關產(chǎn)品:MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞
Normal fibroblast-10細胞系相關產(chǎn)品:58F細胞、PNT1A細胞、JVM-2細胞
Panc02-H0細胞系相關產(chǎn)品:PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
RPTEC/TERT 1細胞系相關產(chǎn)品:RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞
MAVER1細胞系相關產(chǎn)品:SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞
NCI-H1299細胞系相關產(chǎn)品:COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
EHEB細胞系相關產(chǎn)品:KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關產(chǎn)品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
NB.4細胞系相關產(chǎn)品:FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞
SKGIIIA細胞系相關產(chǎn)品:Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞
NCIH2347細胞系相關產(chǎn)品:SW-48細胞、MFE296細胞、KOPN8細胞
U251-MG細胞系相關產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
U251-MG細胞系相關產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
Leukemia 1210細胞系相關產(chǎn)品:293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
PL 45細胞系相關產(chǎn)品:RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
COLO-680N細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
SW-1222細胞系相關產(chǎn)品:SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
KYSE-70細胞系相關產(chǎn)品:HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞
TE1細胞系相關產(chǎn)品:H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
WEHI164細胞系相關產(chǎn)品:RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞
GCT細胞系相關產(chǎn)品:BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
C-643細胞系相關產(chǎn)品:AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
Bat lung細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
HCC941122細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞
MZ-CRC-1細胞系相關產(chǎn)品:H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
OVCAR5細胞系相關產(chǎn)品:SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
HS766T細胞系相關產(chǎn)品:CTLL(2)細胞、HMO6細胞、PZ-HPV-7細胞
J-111細胞系相關產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞
SKMEL2細胞系相關產(chǎn)品:Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
SUDHL1細胞系相關產(chǎn)品:GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
MKN-28細胞系相關產(chǎn)品:H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞
HKBML細胞系相關產(chǎn)品:HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
OVCAR.3細胞系相關產(chǎn)品:Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞
PL9細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
MRC-5 Cell:人胚肺成纖維細胞系
OCI-LY-3細胞系相關產(chǎn)品:MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞
MDCK supertube細胞系相關產(chǎn)品:MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
H676細胞系相關產(chǎn)品:HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞
L cells細胞系相關產(chǎn)品:HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞
KHYG細胞系相關產(chǎn)品:Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
LY細胞系相關產(chǎn)品:H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
PC3M-1E8細胞系相關產(chǎn)品:CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
SU-DHL2細胞系相關產(chǎn)品:HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關產(chǎn)品:293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
SU.86細胞系相關產(chǎn)品:TCam-2細胞、IGROV1細胞、HPAF-I細胞
L-428細胞系相關產(chǎn)品:NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞
B16BL6細胞系相關產(chǎn)品:HEI193細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、P3HR-1細胞
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關鍵字: MRC-5 Cell:人胚肺成纖維細胞系
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