"COLO 320 Cell:人結(jié)腸癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
CHL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373 MG細胞、Chang Cells細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
COLO 320 Cell:人結(jié)腸癌細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
EFM192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
NCI-H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞
RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
A1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞
細胞生長特性:貼壁
COLO 320 Cell:人結(jié)腸癌細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞
JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
NALM-6-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞
L-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞
SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
HEYA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞
AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
COLO 320 Cell:人結(jié)腸癌細胞系
Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
PL 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
GM04671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
OKAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞
M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞
High-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞
A-875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
HCC-2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞
GM01232細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1838細胞、H157細胞、SK 1細胞
Fu97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
P3HR1-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
HTh 74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
HO1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞
IOSE80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞
TE-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞
CAL-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞
143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
MRC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞
CAMA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
Jurkat-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
GA-10 (Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM細胞、CEM細胞、KMY1022細胞
NHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
U343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞
OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
KU 19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
WPMY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TJ905細胞、SNU-C1細胞、KYSE 140細胞
H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
DMS79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
U87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞
SW1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEKO細胞、MOLM-16細胞、Hs1.Tes細胞
CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
FDCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4P細胞、CCRF/CEM細胞、COR-L23細胞
SK-MES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
RERF-LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞
COLO 320 Cell:人結(jié)腸癌細胞系
CTX TNA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
MDA PCa 2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
RSC-96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞
CCC-ESF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
CV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞
TOV-112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
HEK/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞
MES-SA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
SKBR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1846細胞、Jurkat clone A3細胞、MDA-MB-468細胞
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