"BC3 H1 Cell:小鼠腦瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
HL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞
RCC-JF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
BC3 H1 Cell:小鼠腦瘤細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞
H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
OUMS27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
U-343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
BC3 H1 Cell:小鼠腦瘤細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SW-1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N-1細胞、MCF.7細胞、BEAS2B細胞
NS653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞
RERF-LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
L615細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
KNS62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK-2細胞、AML12細胞、SKNEP-1細胞
BC3 H1 Cell:小鼠腦瘤細胞系
Med 283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞
TSUpr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
LLC-PK(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
UPCI:SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞
Mv.1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
Hs729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞
VMCUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
HEK-293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dcl3細胞、Bac 1.2F5細胞、BALB/3T3 clone A31細胞
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
HEL-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
HPAFII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞
SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
MKN-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
AC29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞
MV 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞
TCCPAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
SCC-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2052細胞、COLO 320 DM細胞、SNG-M細胞
WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
SNUC2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
NCI H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
SKGT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEND細胞、HCC15細胞、CCRF SB細胞
GM04679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞
HSAS4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
SK-BR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
OEC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
MDA-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞
NOZC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
HEK 293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞
870細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
BC3 H1 Cell:小鼠腦瘤細胞系
HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
GLC-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞
Lu99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞
22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
NFS60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞
NPC-TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
PG-4 (S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SB細胞、MCF7細胞、COC1/CDDP細胞
C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC 316細胞、SK-MEL-1細胞、MDA-MB415細胞
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