"Hs 683 Cell:人腦膠質(zhì)瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:該細胞源自76歲白人男性的左顳葉側(cè)膠質(zhì)瘤組織,有微絨毛,無橋粒。
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
GP2-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM38細胞、COLO320-DM細胞、NCI-H1944細胞
H4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Hs 683 Cell:人腦膠質(zhì)瘤細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:4傳代,每周換液2次
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞
Human Embryonic Kidney 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞
GP5d細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞
FLC-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F10細胞、B95-8細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞
細胞生長特性:貼壁生長
Hs 683 Cell:人腦膠質(zhì)瘤細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞
SKRC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
BIU-87/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞
LA-N-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞
IPEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
JM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
Hs 683 Cell:人腦膠質(zhì)瘤細胞系
HCO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
GM-637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
JVM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞
EoL-1 cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
H-196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
SK-N-DZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞
SK-N-DZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞
E0771細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、BC-3-H-I細胞、kms 11細胞
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
L-Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
CAL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
TE-671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞
BAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
NCI-H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞
JROECL 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞
COLO 824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
PC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞
NCI-H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL28細胞、L1210細胞、SCC-4細胞
U-118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH82細胞、NTHY-ORI3.1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞
RL-95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
SW480E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
H-2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:67NR細胞、TK10細胞、bEND.3細胞
IR983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
no-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
Porcine Kidney-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞
GM07404A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
ES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞
HEL 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
F9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
S-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞
GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞
Hs 683 Cell:人腦膠質(zhì)瘤細胞系
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
SHI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞
Saos2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞
QSG7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
VMM5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞
HO1N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞
C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
HuCC-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞
624-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
NE1-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU668細胞、SKGIIIA細胞、RenCa細胞
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