"SUM159PT Cell:人乳腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:乳腺癌;女性 MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞 SKMES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞 SU-DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞 Wien133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 SUM159PT Cell:人乳腺癌細胞系 細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞 D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞 TE-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞 C2BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞 University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞 細胞生長特性:貼壁 SUM159PT Cell:人乳腺癌細胞系 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞 TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞 MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞 LNCaP subline C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞 GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞 NRK52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞 COLO678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞 SUM159PT Cell:人乳腺癌細胞系 MC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞 SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞 SW 620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞 CCD1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞 UACC 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞 Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞 SUM-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞 Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CRFK細胞、SuperTube細胞、NB9細胞 HCC1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞 HCC1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞 IALM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞 H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞 D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞 CCD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞 ST細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞 SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞 ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞 SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞 SF17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞 NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞 MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞 COLO 699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞 MUTZ-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞 CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞 Panc203細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞 SUM149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞 MV4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞 MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞 MC-3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞 U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞 HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞 UM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞 H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞 MKN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞 BIU-87/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞 L6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞 COR-L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1細胞、Caov-4細胞、HCC0015細胞 hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞 SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞 WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞 PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞 HCC1171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞 H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞 SUM159PT Cell:人乳腺癌細胞系 SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞 NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞 QBC939細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA-19細胞、TE9細胞、C518細胞 SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞 BE(2)M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞 P3/NS1/Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞 Glioma 261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431細胞、KYSE450細胞、WM 115細胞 Strain L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞 H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞 BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞 MM.1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞 RMG-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMCB細胞、COS1細胞、HASMC細胞 "
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