"YTMLC-90 Cell:人肺鱗癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:肺鱗癌;男性 TE 671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞 SNU761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞 HCC9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞 UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 YTMLC-90 Cell:人肺鱗癌細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 ME-1 [Human leukemia]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞 RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞 QG56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞 MDA-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞 MBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞 細胞生長特性:貼壁 YTMLC-90 Cell:人肺鱗癌細胞系 細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 NCM460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞 OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞 MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞 BT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞 High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞 SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞 Epstein-Barr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞 YTMLC-90 Cell:人肺鱗癌細胞系 Human Microglia Clone 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞 IM9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang Cells細胞、W256細胞、FTC133細胞 WILL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞 RT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞 Huh 7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM(TK-)細胞、SuDHL 2細胞、UM2細胞 GM05384細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞 NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞 H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞 Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞 Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞 BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞 ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞 ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞 BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞 SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞 tdott細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞 SV-HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞 Super Tube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞 HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞 JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞 U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞 U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞 Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞 Anip973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞 Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞 184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞 H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞 HFE-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞 PC3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞 C2BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞 HMEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞 Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞 L5178YR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞 RPPVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞 U20-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞 HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞 4T1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞 U-251_MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞 TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞 HELF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞 INS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL1細胞、22Rv1細胞、COLO 206細胞 EU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞 ECGI10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞 YTMLC-90 Cell:人肺鱗癌細胞系 ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞 Pt K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞 NCIH1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞 SW780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞 SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞 HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞 OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞 HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞 NS-1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞 PT-K75細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞 MDA-MB-231-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞 SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細胞、Hs281T細胞、NCI-747細胞 "
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