"KYSE-450 Cell:人食管癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
GBC-SD細胞系相關產(chǎn)品：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關產(chǎn)品：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
H1581細胞系相關產(chǎn)品：HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞
MDA231-LM2細胞系相關產(chǎn)品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KYSE-450 Cell:人食管癌細胞系
細胞消化過程總結：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
mRTEC細胞系相關產(chǎn)品：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
BE(2)M-17細胞系相關產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
A2058細胞系相關產(chǎn)品：SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
253J-Bladder-V細胞系相關產(chǎn)品：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
COLO 738細胞系相關產(chǎn)品：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
細胞生長特性：貼壁生長
KYSE-450 Cell:人食管癌細胞系
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
MDAPC2B細胞系相關產(chǎn)品：M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞
MFE 296細胞系相關產(chǎn)品：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
BIU87細胞系相關產(chǎn)品：H2591細胞、NCI-H358細胞、HSAEC1-KT細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
U-87MG細胞系相關產(chǎn)品：D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
NCIH1092細胞系相關產(chǎn)品：RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞
SW-480細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H78細胞、MSB-1細胞、BALL-1細胞
KYSE-450 Cell:人食管癌細胞系
Bovine Turbinate細胞系相關產(chǎn)品：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
LK 2細胞系相關產(chǎn)品：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
Reuber H-35細胞系相關產(chǎn)品：STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞
FL62891細胞系相關產(chǎn)品：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
SRA 01/04細胞系相關產(chǎn)品：HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
Swiss 3T3細胞系相關產(chǎn)品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
DMS273細胞系相關產(chǎn)品：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
AR4-IP細胞系相關產(chǎn)品：S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
C-32細胞系相關產(chǎn)品：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞
C-32細胞系相關產(chǎn)品：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞
A-875細胞系相關產(chǎn)品：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
CMT64細胞系相關產(chǎn)品：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
MDAMB157細胞系相關產(chǎn)品：MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
CCD-33Co細胞系相關產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
C81-61細胞系相關產(chǎn)品：JB 6細胞、Hs 445細胞、Panc8.13細胞
J82細胞系相關產(chǎn)品：Y1細胞、SW-480細胞、CAKI 1細胞
MMVECs細胞系相關產(chǎn)品：MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
SK Mel 2細胞系相關產(chǎn)品：VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞
SKML-28細胞系相關產(chǎn)品：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
SF-295細胞系相關產(chǎn)品：HSMC細胞、SUM-149PT細胞、Ly8細胞
COLO 684細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞
C4I細胞系相關產(chǎn)品：V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
NCI-H2444細胞系相關產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
LNT-229細胞系相關產(chǎn)品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
Ball 1細胞系相關產(chǎn)品：KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
NCIH1573細胞系相關產(chǎn)品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關產(chǎn)品：C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
BC-3H-1細胞系相關產(chǎn)品：H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞
F-81細胞系相關產(chǎn)品：BIC細胞、WM266細胞、X63細胞
HA細胞系相關產(chǎn)品：HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞
HEC1B細胞系相關產(chǎn)品：PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞
Fao細胞系相關產(chǎn)品：RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
OE19細胞系相關產(chǎn)品：Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
MUVEC細胞系相關產(chǎn)品：SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞
MRC-9細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
LC-2/ad細胞系相關產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
TE10細胞系相關產(chǎn)品：V-79-4細胞、GM12878細胞、MPC5細胞
LC-1Sq細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
RPMI8402細胞系相關產(chǎn)品：C-33 A細胞、MDCC MSB1細胞、Rat 1細胞
NCI H929細胞系相關產(chǎn)品：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
NH6細胞系相關產(chǎn)品：MonoMac6細胞、WERI細胞、HDQ-P1細胞
VeroC1008細胞系相關產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞
A-427細胞系相關產(chǎn)品：D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞
KYSE-450 Cell:人食管癌細胞系
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關產(chǎn)品：HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
UMR 106細胞系相關產(chǎn)品：SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞
Colon26細胞系相關產(chǎn)品：ABE­8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
Tn5 B1-4細胞系相關產(chǎn)品：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
CWR22-Rv1細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
MV-4-11細胞系相關產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
H-1417細胞系相關產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
FRhK-4細胞系相關產(chǎn)品：IEC-18細胞、EA hy 926細胞、WEHI-164細胞
NPC-TW 039細胞系相關產(chǎn)品：Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞
SupB15W細胞系相關產(chǎn)品：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
C4-2細胞系相關產(chǎn)品：BC-024細胞、NCI-H1693細胞、MDAMB453細胞
XWLC-05細胞系相關產(chǎn)品：H1770細胞、NCI-HUT-69細胞、Hela-Ap-1細胞
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