即用型高保真PCR試劑盒

產品及特點 本產品是即用型的 2×高保真 PCR 預配反應液，含有除引物、模板以外的所有PCR 試劑，包括 Pfu DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等，特別適合于高保真 PCR 反應。

1. Pfu DNA 聚合酶是使用最廣泛的高保真酶，其保真度為普通 Taq 酶的 10 倍。

2. 使用時只需在加入模板和引物并稀釋到 1 倍濃度即可進行 PCR 反應，非常方便，簡化了 PCR 的準備工作。

3. PCR 反應所必需試劑全集于一管之中，數(shù)分鐘即可完成反應體系配置。由于加樣過程少，有利于減少污染，降低實驗誤差。

4. 本產品含電泳染料，PCR 反應液可直接上樣電泳，進一步簡化了操作。

5. 由于各成分的濃度和比例都經過精心優(yōu)化，反應的靈敏度高，特異性強。

6. 適用于基因的高保真擴增和基因定點突變等實驗，得到的 PCR 產物可用于平末端克隆。
規(guī)格及成分 成份 編號 塑料袋包裝
2×高保真 PCR MagicMix 90708a 1.5 mL（黃蓋）
使用手冊 90708sc 1 份 

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為 12 個月。

自備試劑 模板和引物。

使用方法 將本產品與用戶自備的模板，引物混合液按下列推薦使用量（30 uL 反應體系）加入 PCR 管中即可進行 PCR，反應結束后直接取 5-15 uL 電泳檢查擴增結果。如果反應體系不是 30 uL，各成分需要按比例增加或減少。

2×高保真 PCR MagicMix 15 uL

DNA 模板(自備)

哺乳動物基因組 DNA 0.5-1 ug

酵母基因組 DNA 5-500 ng

細菌基因組 DNA 0.5-50 ng

質粒 DNA 5-500 pg

PCR 回收片段 1-100 pg

PCR 引物(自備) 10-20 pmol each

補水到 30 uL

放入 PCR 儀中進行 PCR。由于含有電泳示蹤劑（注意：不是溴化乙錠等 DNA染料），故 PCR 結束后可以取 5-10 uL 直接上樣電泳, 紅色染料電泳速度相當于 50

bp DNA 片段。

參考擴增條件：

預變性 94℃ 4 min

PCR (30 個循環(huán))

94℃ 30 s

50℃ 30 s

68℃ 0.5kb/ min

延伸 68℃ 10 min

注意：

1. 本產品的 Pfu DNA 聚合酶比 Taq DNA 聚合酶的延伸反應速率低，因此我們推薦的擴增延伸反應時間為每 kb 需 2 分種。

2. Pfu 酶 3’-5’外切酶活性可降解引物，所以強烈建議在冰上配置完成 PCR反應液后，立即放入 PCR 儀中進行擴增，擴增完畢后立即進行電泳檢測。

3. 本產品擴增產物為平末端，不可以直接進行 TA 克隆，可以使用B 載體(CAT#:51104)進行克隆。如需要進行 TA 克隆，建議對 PCR 產物純化后，用加 A 試劑盒(CAT#:60105)加 A 后再進行 TA 克隆。

4. 由于 Pfu 無 5’到 3’外切酶的活性，所以本試劑盒不能用于實時熒光PCR 。