"COLO201細胞系|人結(jié)直腸腺癌細胞 HS-C0366961 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 COLO201細胞系|人結(jié)直腸腺癌細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 KALS-1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:多邊形;細胞傳代方法:1:2傳代 GES-1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 Hs68細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H498細胞系;細胞生長特性:半貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PLA-802細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 MPC-11細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 COLO201細胞系|人結(jié)直腸腺癌細胞 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 常見培養(yǎng)細胞預(yù)防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質(zhì)不同,對各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好,預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性,且對細胞本身也有一定影響,因此為避免誘導抗藥細菌,應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應(yīng)選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動的紫外燈至少消毒30min,加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 TALL-104細胞系;細胞生長特性:懸?。患毎螒B(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 LN18細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 AKR細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HTR-8/Svneo細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 U27KM細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 BC-024細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 COLO201細胞系|人結(jié)直腸腺癌細胞 RT4細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:多角 ;細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,每周2-3次。 Colon26細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CCC-HEH細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CTSC-3細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HSF細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代 ARIP細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SW 954[SW-954,SW954]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PC-2細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 LK2細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H2081細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:聚團懸浮;細胞傳代方法:隨細胞的密度而增加 SK-LU-1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代;每周換液2次。 KURAMOCHI細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:10傳代;每周換液2-3次 SP2/0細胞系;細胞生長特性:半貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MCMEC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MA-104細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HFSF細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次 PIG1細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 hEM15A(chǔ)細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hep-G2細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MC-3T3細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SNU-C1細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:每3-5天換液。 HSC-5細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H7402細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 RSC-364細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H2073細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:3-1:6傳代 KOPN-8細胞系;細胞生長特性:懸?。患毎螒B(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NK92細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 RIN-m細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HT-1376細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 HMSC-bm細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HLCL9B10細胞系;細胞生長特性:懸?。患毎螒B(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 RASMC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HepG2215細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 OE19細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:2傳代 NCI-H378細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 GES 1細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 C13K細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 B104細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 L428細胞系;細胞生長特性:懸浮;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HepG2細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:2傳代 NCI-H711[H711]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H2347細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:2-1:6傳代,每周2-3次。 RKO細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 PA-TU-8988S細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KALS-1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:多邊形;細胞傳代方法:1:2傳代 SW 1990細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;多角形;細胞傳代方法:1:2傳代;3天傳代一次。 KMS11細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 QGY-7703細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿 Hs 870.T細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞;細胞傳代方法:1:2—1:3傳代;每周換液2-3次 Neuro-2a/N2a細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HCC 94細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代 GES1細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 L-02(HL-7702)細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 RT4細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:多角 ;細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,每周2-3次。 Jurkat77細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 WISH細胞系;細胞生長特性:貼壁生長 ;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,每周2-3次。 COLO201細胞系|人結(jié)直腸腺癌細胞 KP2細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H2171細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:聚團懸??;細胞傳代方法:3-4天換液1次。 MC53細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 3T3-Swiss albino細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;細胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。 PAXC-003細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天傳1次 "
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