"3T3-F442A|小鼠脂肪前體細胞

細胞背景資料：脂肪前體細胞；雄性；Swiss albino

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

3T3-F442A Cell

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貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。

3T3-F442A|小鼠脂肪前體細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

RD細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：4傳代，3-4天換液1次；細胞形態(tài)特性：梭型和大的多核細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

CV-1細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：CV-1細胞株是1964年由JensenFC等建系的，源自成年雄性非洲綠猴腎，被用于Rous肉瘤病毒的轉(zhuǎn)染研究?？勺鳛镾V40載體的轉(zhuǎn)染宿主。

Hs 729細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

A20[A-20]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

OE21細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

CHO/dhFr-細胞系；細胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內(nèi)可長滿；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：該細胞為二葉酸還原酶缺陷型；培養(yǎng)基中沒有HT（次黃嘌呤-胸腺嘧啶）時，該細胞會死亡；培養(yǎng)基中加入甲喋呤可以防止對該藥物具有低抵抗性的回變細胞的生長；可作轉(zhuǎn)染宿主。

SK-MES-1細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：源于一位65歲患有肺鱗狀細胞癌的白人男性，自轉(zhuǎn)移性胸腔積液分離而來。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

3T3-F442A|小鼠脂肪前體細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

THP-1細胞系；細胞傳代方法：維持細胞濃度在2-4×105-8×105/ml，勿超過1×106/ml；2-3天換液1次；細胞形態(tài)特性：單核細胞；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：該細胞從一名1歲的患有急性單核細胞性白血病的男孩的外周血中分離建立。該細胞可以吞噬乳膠顆粒和激活的紅細胞，細胞膜和胞漿內(nèi)均沒有免疫球蛋白，表達C3R和FcR；可受佛波酯TPA誘導向單核系方向分化；可作為轉(zhuǎn)染宿主。

Neuro-2a細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：4傳代；2-3天換液1次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

AMO-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：半貼壁；細胞背景資料：漿細胞骨髓瘤；女性

OV90細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：卵巢癌；腹水轉(zhuǎn)移；女性

TE12細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞培養(yǎng)溫度：維持培養(yǎng)細胞旺盛生長，必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細胞對培養(yǎng)溫度要求也不同。人體細胞培養(yǎng)的標準溫度為３６.５℃±０.５℃，偏離這一溫度范圍，細胞的正常代謝會受到影響，甚至死亡。培養(yǎng)細胞對低溫的耐受力較對高溫強，溫度上升不超過３９℃時，細胞代謝與溫度成正比；人體細胞在３９-４０℃１小時，即能受到一定損傷，但仍有可能恢復；在４０-４１℃１小時，細胞會普遍受到損傷，僅小半數(shù)有可能恢復；４１-４２℃１小時，細胞受到嚴重損傷，大部分細胞死亡，個別細胞仍有恢復可能；當溫度在４３℃以上１小時，細胞全部死亡。相反，溫度不低于０℃時，對細胞代謝雖有影響，但并無傷害作用；把細胞放入２５－３５℃時，細胞仍能生存和生長，但速度減慢；放在４℃數(shù)小時后，再回到３７℃培養(yǎng)，細胞仍能繼續(xù)生長。細胞代謝隨溫度降低而減慢。當溫度降至冰點以下時，細胞可因胞質(zhì)結冰受損而死亡。但是，如果向培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護劑(二甲亞砜或甘油)，可在深低溫下如－８０℃或－１９６℃(液氮)長期保存。

SW579細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：在裸鼠中成瘤(產(chǎn)生三級惡性紡錘狀巨細胞瘤)。 

LSC-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肝星形細胞；自發(fā)永生；Wistar

L5178Y細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

HuTu80細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

TC7細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：結腸癌；女性

TC7細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：結腸癌；女性

KP-N-RT-BM-1細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：成神經(jīng)細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

MDA-MB-435S細胞系；細胞傳代方法：消化3-5分鐘，1：2,3天內(nèi)可長滿；細胞形態(tài)特性：紡錘形；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：MDA-MB-435S是一種紡錘形的細胞，1976年由其親本(435)中篩選得到。435是從31歲的轉(zhuǎn)移性乳腺導管腺癌女性患者胸水中分離得到。當用熒光染料對微管蛋白進行染色時親本細胞顯現(xiàn)散布特征(II型)。最近通過cDNA陣列研究表明，親本(MDA-MB-435)可歸入黑素瘤起源。

GIST430細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

RPMI8402細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸??；細胞背景資料：急性T淋巴細胞白血?。慌?/div>