1. 細(xì)胞性狀
細(xì)胞名稱 | 猴腎細(xì)胞Marc-145 (Monkey Kidney Cells Marc-145) |
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來源 | 猴腎組織衍生 |
類型 | 成纖維樣細(xì)胞 |
生長方式 | 貼壁生長 |
特征 | 對豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)敏感 |
常用檢測標(biāo)志物 | 細(xì)胞骨架蛋白Vimentin、CK等 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件 | 專用完全培養(yǎng)基,37°C,5% CO? |
凍存條件 | 90%FBS + 10%DMSO |
2. 細(xì)胞簡介
猴腎細(xì)胞Marc-145(Monkey Kidney Cells Marc-145,簡稱Marc-145細(xì)胞)源自猴腎臟組織,是一種貼壁生長的成纖維樣細(xì)胞系。Marc-145細(xì)胞因其對豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus, PRRSV)的高敏感性而廣泛應(yīng)用于動(dòng)物疫病研究領(lǐng)域。該細(xì)胞在長期傳代中保持了較強(qiáng)的生長穩(wěn)定性和可重復(fù)性,為病毒分離、復(fù)制及分子機(jī)制研究提供了理想的宿主平臺。由于其靈長類來源,Marc-145細(xì)胞在基因表達(dá)譜和細(xì)胞功能上與人源細(xì)胞具有一定相似性,因此在部分跨物種病毒學(xué)研究中也具有參考價(jià)值。作為PRRSV研究的經(jīng)典工具,Marc-145細(xì)胞已被各大實(shí)驗(yàn)室廣泛用于病毒學(xué)研究、抗病毒藥物篩選、疫苗開發(fā)及免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),其重要性在獸醫(yī)病原學(xué)和分子病毒學(xué)領(lǐng)域已得到充分證明。
3. 科研與應(yīng)用領(lǐng)域
猴腎細(xì)胞Marc-145在科研應(yīng)用中具有突出的地位,主要應(yīng)用領(lǐng)域包括:
PRRSV分離與培養(yǎng):Marc-145細(xì)胞是目前實(shí)驗(yàn)室分離、擴(kuò)增豬繁殖與呼吸綜合征病毒的經(jīng)典宿主細(xì)胞,被廣泛用于基礎(chǔ)研究與疫苗開發(fā)。
病毒致病機(jī)制研究:通過Marc-145細(xì)胞體外感染實(shí)驗(yàn),科研人員能夠觀察PRRSV復(fù)制周期、病毒與宿主相互作用及病理過程。
疫苗研發(fā)與評價(jià):Marc-145細(xì)胞為滅活疫苗、減毒疫苗及新型重組疫苗的研發(fā)提供了重要實(shí)驗(yàn)平臺。
抗病毒藥物篩選:利用Marc-145細(xì)胞可快速檢測化合物或中藥提取物對PRRSV的抑制作用,從而開展藥物篩選與機(jī)制研究。
病毒與宿主免疫關(guān)系:Marc-145細(xì)胞可用于研究PRRSV如何逃避宿主免疫反應(yīng),以及宿主細(xì)胞如何通過固有免疫因子限制病毒復(fù)制。
這些應(yīng)用使Marc-145細(xì)胞成為PRRSV研究中不可替代的重要工具。
4. 推薦實(shí)驗(yàn)方案
在Marc-145細(xì)胞的研究中,以下實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)較為常見:
病毒感染實(shí)驗(yàn):將PRRSV接種于Marc-145細(xì)胞,觀察細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)、病毒滴度變化及復(fù)制動(dòng)力學(xué)。
抗病毒藥物實(shí)驗(yàn):在感染模型中加入候選化合物,檢測病毒RNA水平、病毒蛋白表達(dá)及細(xì)胞活力變化。
免疫相關(guān)實(shí)驗(yàn):檢測感染后Marc-145細(xì)胞中干擾素及細(xì)胞因子的表達(dá)水平,以分析病毒與宿主免疫調(diào)控關(guān)系。
分子機(jī)制研究:通過Western blot、RT-qPCR等方法檢測病毒關(guān)鍵基因與宿主受體的相互作用。
基因編輯與轉(zhuǎn)染:利用CRISPR/Cas9或siRNA技術(shù)在Marc-145細(xì)胞中敲除或過表達(dá)特定基因,研究其在PRRSV復(fù)制過程中的作用。
這些實(shí)驗(yàn)方案為病毒致病機(jī)制研究和新型治療策略開發(fā)提供了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
5. 技術(shù)與性能優(yōu)勢
與其他宿主細(xì)胞系相比,Marc-145細(xì)胞具有以下顯著優(yōu)勢:
對PRRSV高敏感性:相比常規(guī)豬源細(xì)胞,Marc-145細(xì)胞對PRRSV感染更加敏感,便于病毒分離與檢測。
傳代穩(wěn)定性強(qiáng):長期培養(yǎng)下仍能保持一致的增殖特性和對病毒的敏感性,適合大規(guī)模實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)適應(yīng)性好:Marc-145細(xì)胞適合多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法,包括轉(zhuǎn)染、病毒載體感染及基因編輯。
科研應(yīng)用廣泛:已成為研究PRRSV致病機(jī)制、疫苗研發(fā)、藥物篩選的重要細(xì)胞工具。
跨學(xué)科價(jià)值:由于靈長類來源,該細(xì)胞在部分跨物種病毒學(xué)研究中也能作為參考模型。
這些優(yōu)勢確保了Marc-145細(xì)胞在病毒學(xué)與獸醫(yī)病原學(xué)研究中的重要地位。
6. 結(jié)論與前景展望
猴腎細(xì)胞Marc-145憑借其對豬繁殖與呼吸綜合征病毒的獨(dú)特敏感性,已經(jīng)成為病毒學(xué)研究和疫苗開發(fā)的核心工具。未來,隨著分子生物學(xué)和免疫學(xué)研究的深入,Marc-145細(xì)胞有望在更多前沿方向上得到應(yīng)用。例如,通過轉(zhuǎn)基因改造提高其對不同PRRSV毒株的適應(yīng)性,或結(jié)合類器官和3D培養(yǎng)體系,模擬更接近體內(nèi)環(huán)境的病毒感染過程。此外,Marc-145細(xì)胞還可能在跨物種病毒傳播研究、免疫逃逸機(jī)制解析及新型抗病毒藥物開發(fā)中發(fā)揮更大作用。可以預(yù)見,Marc-145細(xì)胞將在獸醫(yī)病原學(xué)、傳染病防控及新型疫苗研發(fā)領(lǐng)域繼續(xù)保持不可替代的重要性。
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