1. 細(xì)胞性狀

2. 細(xì)胞簡(jiǎn)介

大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 HAPI（HAPI細(xì)胞，全稱 Highly Aggressive Proliferating Immortalized Microglia）是由SD大鼠腦組織分離的小膠質(zhì)細(xì)胞，經(jīng)永生化改造后建立的細(xì)胞系。小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)在免疫細(xì)胞，具有吞噬、抗原呈遞、分泌炎癥因子的功能，在維持腦內(nèi)穩(wěn)態(tài)和病理反應(yīng)中起核心作用。與原代小膠質(zhì)細(xì)胞相比，HAPI細(xì)胞具備更強(qiáng)的增殖能力和傳代穩(wěn)定性，避免了原代細(xì)胞獲取難、壽命短的缺陷。

在形態(tài)學(xué)上，HAPI細(xì)胞通常呈小型梭形或不規(guī)則形態(tài)，部分可表現(xiàn)出分枝突起，模擬活化與靜息狀態(tài)小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)。分子水平上，HAPI細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)CD11b、Iba1、CD68等經(jīng)典小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物，能夠在炎癥刺激（如LPS、IFN-γ）下被激活，分泌IL-1β、TNF-α等炎癥因子，反映神經(jīng)炎癥的病理狀態(tài)。憑借其穩(wěn)定的特性，大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞HAPI成為研究神經(jīng)炎癥、神經(jīng)退行性疾病（如阿爾茨海默病、帕金森?。⒛X損傷修復(fù)及神經(jīng)免疫交互的重要細(xì)胞模型。

3. 科研與應(yīng)用領(lǐng)域

• 神經(jīng)炎癥機(jī)制研究：HAPI細(xì)胞常用于構(gòu)建LPS刺激模型，模擬腦內(nèi)炎癥反應(yīng)，揭示TLR4/NF-κB等信號(hào)通路的作用。

• 神經(jīng)退行性疾病：在阿爾茨海默病、帕金森病等模型中，HAPI細(xì)胞用于研究β-淀粉樣蛋白（Aβ）、α-突觸核蛋白等異常聚集蛋白對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞的激活作用。

• 藥物篩選與毒理學(xué)評(píng)價(jià)：通過檢測(cè)候選藥物對(duì)HAPI細(xì)胞炎癥因子分泌、ROS生成、凋亡信號(hào)的影響，用于評(píng)價(jià)神經(jīng)保護(hù)劑和抗炎藥物。

• 免疫學(xué)與細(xì)胞交互：HAPI細(xì)胞能與神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)，用于研究神經(jīng)免疫相互作用。

• 缺血與損傷模型：應(yīng)用于氧糖剝奪（OGD）、谷氨酸興奮毒性實(shí)驗(yàn)，揭示小膠質(zhì)細(xì)胞在腦缺血和損傷修復(fù)中的作用。

• 腫瘤微環(huán)境研究：HAPI細(xì)胞還可作為腦膠質(zhì)瘤模型的免疫環(huán)境組成部分，研究腫瘤相關(guān)小膠質(zhì)細(xì)胞的功能。

4. 推薦實(shí)驗(yàn)方案

• 免疫熒光與流式檢測(cè)：檢測(cè)CD11b、Iba1、CD68等表型標(biāo)志物，確認(rèn)小膠質(zhì)細(xì)胞特性。

• 炎癥因子分泌實(shí)驗(yàn)：LPS、IFN-γ刺激后，ELISA檢測(cè)TNF-α、IL-1β、IL-6分泌水平。

• ROS與凋亡分析：應(yīng)用DCFH-DA探針或Annexin V/PI雙染，評(píng)估HAPI細(xì)胞活性和凋亡狀態(tài)。

• 信號(hào)通路研究：Western blot檢測(cè)NF-κB、MAPK、NLRP3炎癥小體的活化情況。

• 共培養(yǎng)體系：與原代神經(jīng)元共培養(yǎng)，觀察小膠質(zhì)細(xì)胞激活對(duì)神經(jīng)元存活及突觸可塑性的影響。

• 藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)：應(yīng)用抗炎藥物或神經(jīng)保護(hù)劑，評(píng)估其在HAPI模型中對(duì)炎癥因子抑制和細(xì)胞保護(hù)的效果。

5. 技術(shù)與性能優(yōu)勢(shì)

大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞HAPI在科研應(yīng)用中展現(xiàn)了明顯優(yōu)勢(shì)。首先，其永生化改造賦予了較強(qiáng)的增殖能力和長(zhǎng)期傳代穩(wěn)定性，解決了原代小膠質(zhì)細(xì)胞壽命短、不易獲取的限制。其次，HAPI細(xì)胞在炎癥因子刺激下能穩(wěn)定激活，分泌多種細(xì)胞因子，具備高度可重復(fù)性，適合建立標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/p>

此外，HAPI細(xì)胞對(duì)LPS、谷氨酸、β-淀粉樣蛋白等刺激有良好響應(yīng)，能真實(shí)模擬神經(jīng)炎癥與神經(jīng)退行性疾病過程。同時(shí)，其與其他神經(jīng)細(xì)胞良好的兼容性，擴(kuò)展了其在神經(jīng)免疫交互與神經(jīng)保護(hù)研究中的應(yīng)用。相比其他小膠質(zhì)細(xì)胞模型，HAPI細(xì)胞具有更高的實(shí)驗(yàn)可控性和穩(wěn)定性，是藥物研發(fā)和機(jī)制研究的優(yōu)選工具。

6. 結(jié)論與前景展望

大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞HAPI（Highly Aggressive Proliferating Immortalized Microglia）是神經(jīng)科學(xué)研究中極具價(jià)值的細(xì)胞模型。憑借其穩(wěn)定的增殖特性、炎癥反應(yīng)可控性以及與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)因子的高度敏感性，HAPI細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于神經(jīng)炎癥、神經(jīng)退行性疾病、藥物篩選和腦損傷修復(fù)研究。

未來，隨著單細(xì)胞測(cè)序、類器官技術(shù)和基因編輯的發(fā)展，HAPI細(xì)胞將被進(jìn)一步應(yīng)用于精準(zhǔn)模擬腦內(nèi)復(fù)雜免疫環(huán)境，推動(dòng)阿爾茨海默病、帕金森病等神經(jīng)系統(tǒng)疾病的機(jī)制解析與新藥開發(fā)。同時(shí)，HAPI細(xì)胞也將在神經(jīng)免疫與腫瘤微環(huán)境研究中發(fā)揮更大作用，成為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)和神經(jīng)藥理學(xué)的重要平臺(tái)。