2. 細(xì)胞簡(jiǎn)介

人支氣管上皮樣細(xì)胞HBE HBE135-E6E7（Human Bronchial Epithelial Cells, HBE135-E6E7）來源于正常人支氣管上皮，通過轉(zhuǎn)染HPV16 E6/E7基因?qū)崿F(xiàn)永生化。該細(xì)胞保持了支氣管上皮細(xì)胞的形態(tài)特征和部分分化能力，呈多角形或不規(guī)則多邊形貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞間通過緊密連接相互聯(lián)系。HBE135-E6E7廣泛應(yīng)用于呼吸道生理與病理機(jī)制研究，尤其適合進(jìn)行空氣污染物、病原體感染、炎癥反應(yīng)及肺部疾病的細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)。作為非腫瘤性上皮細(xì)胞系，它為研究支氣管上皮的正常功能及疾病早期變化提供了可靠模型。

3. 科研與應(yīng)用領(lǐng)域

HBE HBE135-E6E7細(xì)胞的科研與應(yīng)用領(lǐng)域包括：

- 呼吸道上皮屏障功能與修復(fù)機(jī)制研究

- 空氣污染物（PM2.5、臭氧等）對(duì)支氣管上皮的毒理效應(yīng)分析

- 病原體（流感病毒、冠狀病毒、細(xì)菌等）感染機(jī)制及宿主反應(yīng)研究

- 炎癥反應(yīng)及細(xì)胞因子調(diào)控機(jī)制探究

- 慢性阻塞性肺疾病（COPD）、哮喘等呼吸道疾病的分子機(jī)制研究

- 藥物篩選與安全性評(píng)估，尤其是吸入類藥物的作用研究

HBE135-E6E7細(xì)胞形態(tài)穩(wěn)定、生長(zhǎng)可控，是呼吸系統(tǒng)基礎(chǔ)研究和新藥開發(fā)的優(yōu)選體外模型。

4. 推薦實(shí)驗(yàn)方案

【氣-液界面（ALI）培養(yǎng)】
1. 將HBE135-E6E7接種于Transwell膜上，待細(xì)胞融合后去除上室培養(yǎng)基形成空氣暴露面；
2. 維持下室含培養(yǎng)基供給營養(yǎng)，促進(jìn)細(xì)胞分化形成類纖毛結(jié)構(gòu)；
3. 適合模擬氣道上皮暴露環(huán)境，研究病原體感染與藥物吸收。

【病原體感染實(shí)驗(yàn)】
1. 在ALI條件下，將病毒或細(xì)菌接種于細(xì)胞暴露面；
2. 一定時(shí)間后收集細(xì)胞和上清，檢測(cè)病原體復(fù)制與炎癥因子釋放。

【污染物暴露實(shí)驗(yàn)】
使用氣溶膠發(fā)生器或直接添加PM2.5懸液，評(píng)估細(xì)胞存活率、氧化應(yīng)激水平和炎癥反應(yīng)。

注意：長(zhǎng)期培養(yǎng)需定期驗(yàn)證E-cadherin等上皮標(biāo)志物表達(dá)。

5. 技術(shù)與性能優(yōu)勢(shì)

HBE135-E6E7細(xì)胞兼具原代細(xì)胞的表型特征與永生化細(xì)胞的可傳代性，避免了原代細(xì)胞壽命短、批間差異大的問題。該細(xì)胞對(duì)環(huán)境刺激、病原體暴露有良好反應(yīng)，且形態(tài)及功能在多代傳代中穩(wěn)定。HBE135-E6E7對(duì)氣-液界面培養(yǎng)適應(yīng)性好，可誘導(dǎo)形成類纖毛和杯狀細(xì)胞，為研究氣道屏障功能、纖毛運(yùn)動(dòng)、分泌機(jī)制提供了可靠實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。

6. 結(jié)論與前景展望

人支氣管上皮樣細(xì)胞HBE135-E6E7是研究氣道上皮結(jié)構(gòu)與功能的重要工具，在呼吸道疾病機(jī)制研究、空氣污染危害評(píng)估、病原體感染模型建立等方面具有廣泛應(yīng)用價(jià)值。未來，結(jié)合單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組、三維氣道類器官模型及精準(zhǔn)藥物遞送技術(shù)，HBE135-E6E7細(xì)胞將在呼吸系統(tǒng)疾病的基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化中發(fā)揮更大作用。