產(chǎn)品介紹
活性氧（ROS）是含氧的高活性化學(xué)分子，包括超氧化物、羥自由基、單線態(tài)氧和過氧化物等。這類分子因外層電子未配對(duì)而具有極強(qiáng)的反應(yīng)活性，既是氧代謝的天然副產(chǎn)物，又在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。
ROS Brite? DHCF探針具有與2',7'-二氯二氫熒光素二乙酸酯相似的氧化還原特性，但其光譜顯著紅移。該探針可被細(xì)胞酯酶水解為無熒光的還原形式，隨后被H2O2氧化為高熒光性染料。它能響應(yīng)多種在氧化應(yīng)激時(shí)增強(qiáng)的氧化反應(yīng)，適用于：1）監(jiān)測(cè)細(xì)胞氧化還原過程；2）與FITC標(biāo)記抗體或GFP細(xì)胞系進(jìn)行多重檢測(cè)。其氧化產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)呈現(xiàn)強(qiáng)熒光，為病理?xiàng)l件下的氧化應(yīng)激研究提供了重要工具。
實(shí)驗(yàn)方案
本方案僅供參考，需根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行調(diào)整。在配制ROS Brite?工作液前，請(qǐng)先完成對(duì)細(xì)胞或動(dòng)物的預(yù)處理。
實(shí)驗(yàn)步驟
1.儲(chǔ)備液配制：使用DMSO配制10-20 mM ROS Brite?儲(chǔ)備液，用含20 mM Hepes緩沖液的Hanks平衡鹽溶液（HHBS）稀釋至5-10 μM工作濃度
2.樣本預(yù)處理（示例：RASM細(xì)胞可用50-100 nM血管緊張素II處理3-5小時(shí)）
3.加入步驟1配制的ROS Brite?工作液（5-10 μM），37°C孵育15-30分鐘
*注：最合適的濃度因細(xì)胞系而異（如貨號(hào)16053建議使用0.5-5 μM），需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定*
4.移除染液，用HHBS緩沖液洗滌
5.選用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀、活體成像進(jìn)行熒光檢測(cè)
注：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
關(guān)鍵字： AAT Bioquest;活性氧; ROS Brite DHCF;
西安百螢生物科技有限公司是一家專注從事生物、化學(xué)試劑及其試劑盒的高新技術(shù)企業(yè)；主要以熒光探針，分子探針，核酸/蛋白質(zhì)標(biāo)記、細(xì)胞檢測(cè)等技術(shù)和產(chǎn)品為研發(fā)核心，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于基因合成、細(xì)胞檢測(cè)、活體示蹤，抗體標(biāo)記、新藥篩選等領(lǐng)域。