LS174T人結(jié)腸癌細(xì)胞

 基本特性:

種屬來源:人

性別年齡:58 歲，女性

組織來源:結(jié)腸

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 凍存管

培養(yǎng)條件:EMEM+10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

凍存條件:90% FBS + 10% DMSO

傳代方法:1:3 傳代, 2-3 天傳 1 代

1. 細(xì)胞系基本信息

名稱：LS174T

來源：人結(jié)腸腺癌細(xì)胞，分離自一名50歲男性結(jié)腸腺癌患者的肝臟轉(zhuǎn)移灶，具有高度分化特征，常被用于研究結(jié)腸癌的黏液分泌、侵襲及轉(zhuǎn)移機(jī)制。

特性：

組織學(xué)類型：黏液腺癌（Mucinous Adenocarcinoma），高表達(dá)黏蛋白（如MUC2、MUC5AC）。

基因突變譜：

常見突變：APC突變（導(dǎo)致WNT通路激活）、KRAS突變（常見于G12D或G12V位點(diǎn)）、TP53突變（功能失活）。

其他特征：可能攜帶PIK3CA突變、SMAD4缺失或MSI-L（微衛(wèi)星低不穩(wěn)定性）。

免疫表型：

低表達(dá)PD-L1（通常為MSI-L型），TMB（腫瘤突變負(fù)荷）較低，對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑響應(yīng)有限。

高表達(dá)黏蛋白相關(guān)基因（如MUC2、MUC5AC），可能影響腫瘤微環(huán)境（TME）中的免疫細(xì)胞浸潤。

功能特性：

黏液分泌能力強(qiáng)，適合研究黏液腺癌的生物學(xué)行為。

侵襲性中等，遷移能力較強(qiáng)，可用于轉(zhuǎn)移機(jī)制研究。

2. 結(jié)腸癌背景與LS174T的關(guān)聯(lián)

結(jié)腸癌分子分型：

CMS分型（Consensus Molecular Subtypes）：

CMS2（經(jīng)典型）：WNT通路激活，上皮特征，預(yù)后較好。

CMS3（代謝型）：代謝異常（如糖酵解增強(qiáng)、脂肪酸合成增加），KRAS突變。

CMS4（間質(zhì)型）：EMT（上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化）特征，TGF-β通路激活，預(yù)后較差。

LS174T的分子亞型：

可能屬于CMS2型（經(jīng)典型），因其攜帶APC突變、KRAS突變和WNT通路激活。

黏液分泌特征可能使其在CMS分型中具有獨(dú)特性，需結(jié)合基因表達(dá)譜進(jìn)一步驗(yàn)證。

臨床相關(guān)性：

黏液腺癌占結(jié)腸癌的約10%-15%，預(yù)后通常較差，對(duì)化療響應(yīng)較低。

LS174T作為黏液腺癌細(xì)胞模型，可用于研究黏液分泌對(duì)腫瘤進(jìn)展的影響及潛在治療靶點(diǎn)。

3. LS174T在科研中的應(yīng)用

藥物篩選與耐藥研究：

化療藥物：測(cè)試5-氟尿嘧啶（5-FU）、奧沙利鉑、伊立替康的敏感性，研究黏液分泌對(duì)藥物滲透的影響。

靶向藥物：

EGFR抑制劑：對(duì)KRAS突變型結(jié)腸癌（如LS174T）通常無效，但可用于驗(yàn)證耐藥機(jī)制。

MEK抑制劑：針對(duì)KRAS突變后的MAPK通路激活，如曲美替尼（Trametinib）。

PI3K-AKT抑制劑：針對(duì)PIK3CA突變，如Alpelisib。

耐藥機(jī)制：

黏液層可能形成物理屏障，阻礙藥物滲透，導(dǎo)致化療耐藥。

KRAS突變導(dǎo)致的MAPK通路持續(xù)激活，可能引發(fā)EGFR抑制劑耐藥。

分子機(jī)制研究：

WNT通路：APC突變導(dǎo)致β-catenin核積累，激活下游基因（如c-MYC、CCND1）。

KRAS信號(hào)：KRAS突變激活RAS-RAF-MEK-ERK通路，促進(jìn)增殖和存活。

黏液分泌調(diào)控：研究MUC2、MUC5AC等黏蛋白的表達(dá)調(diào)控機(jī)制，探索干預(yù)靶點(diǎn)。

3D培養(yǎng)與類器官模型：

結(jié)合3D培養(yǎng)技術(shù)，模擬黏液腺癌的微環(huán)境，研究黏液層對(duì)腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的影響。

通過類器官模型驗(yàn)證藥物療效，推動(dòng)個(gè)性化治療。

4. 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

細(xì)胞培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)基：通常使用EMEM（Eagle's Minimum Essential Medium）或DMEM，含10%-20%胎牛血清（FBS）和抗生素（如青霉素、鏈霉素）。

形態(tài)特征：細(xì)胞呈上皮樣，貼壁生長，黏液分泌能力強(qiáng)，培養(yǎng)液中可能形成黏液團(tuán)塊。

污染檢測(cè)：定期檢測(cè)支原體污染，避免實(shí)驗(yàn)誤差。

基因突變驗(yàn)證：

通過PCR或測(cè)序確認(rèn)APC、KRAS、TP53突變狀態(tài)，確保細(xì)胞系身份正確。

功能實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

結(jié)合黏液分泌實(shí)驗(yàn)（如PAS染色、黏蛋白免疫組化），驗(yàn)證LS174T的黏液腺癌特征。

通過Transwell實(shí)驗(yàn)研究黏液層對(duì)腫瘤細(xì)胞侵襲的影響

公司出售的產(chǎn)品：

 注意事項(xiàng)：

污染防控：細(xì)菌污染：培養(yǎng)液渾濁、變黃，需添加抗生素（如青霉素-鏈霉素），污染嚴(yán)重時(shí)丟棄。

霉菌污染：顯微鏡下可見絲狀/絮狀漂浮物，需徹底消毒培養(yǎng)箱（過氧乙酸擦拭+紫外線照射），污染細(xì)胞立即丟棄。

支原體污染：無明顯外觀變化，需定期用PCR或熒光法檢測(cè)，污染后可用支原體清除試劑處理。

操作規(guī)范：收到細(xì)胞后，先檢查包裝完整性及干冰狀態(tài)，鏡檢細(xì)胞形態(tài)并拍照記錄（40x、100x、200x）。

未開封細(xì)胞若污染或活性差（3天內(nèi)反饋），可申請(qǐng)重發(fā)；客戶操作失誤導(dǎo)致問題不重發(fā)。

運(yùn)輸與保存：干冰運(yùn)輸：凍存管含1×10? cells，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或-80℃冰箱。

常溫運(yùn)輸：T25培養(yǎng)瓶，收到后靜置3-4小時(shí)穩(wěn)定狀態(tài)，再換液或傳代。