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SF767(人腦瘤細(xì)胞)
生長(zhǎng)培養(yǎng)基:MEM+10% FBS+1% P/S
規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶


貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):
1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基。
2. 加入1.0 mL 0.25(w/v)Trypsin-0.53mM EDTA溶液,并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育,直至細(xì)胞從壁上脫落分離。此過(guò)程大約需要3至5分鐘(此處為12.5 cm2培養(yǎng)瓶所用體積,可根據(jù)實(shí)際情況增減用量)。
3. 加入2mL完全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶,并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞從培養(yǎng)瓶表面吹落,并使細(xì)胞分散。
4. 離心200x g/5 min,去除上清后,取適量的培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸,取適量懸液置于新的培養(yǎng)瓶中,并加入新鮮細(xì)胞完全培養(yǎng)基至總體積為4mL。
5. 將細(xì)胞置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
傳代比例:建議 1:6 至 1:9
培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。
懸浮細(xì)胞傳代培養(yǎng):
懸浮細(xì)胞的傳代可通過(guò)補(bǔ)加或置換新鮮培養(yǎng)基的方式來(lái)完成,具體做法如下:
1. 取出少量細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力檢測(cè),當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1×106 cells/mL 時(shí),進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
2. 取足量細(xì)胞加入到盛有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,將細(xì)胞密度維持在2-3×105cells/mL。
3. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細(xì)胞達(dá)到傳代培養(yǎng)的密度,則進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
培養(yǎng)基換液: 每隔2至3天。
注意:培養(yǎng)瓶應(yīng)使用帶濾膜瓶蓋以保持培養(yǎng)基與空氣和CO2
拆包 & 存儲(chǔ):
1. 請(qǐng)立即檢查包裝袋是否有破損或漏液
2. 請(qǐng)立即將細(xì)胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進(jìn)行培養(yǎng)傳代
注意:如為凍存管,請(qǐng)收到后立即解凍培養(yǎng)
培養(yǎng)瓶中細(xì)胞操作步驟:
對(duì)于貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,寄送前,我們會(huì)將培養(yǎng)基充滿整個(gè)培養(yǎng)瓶,以減少產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中貼壁細(xì)胞的脫落。
1. 收到細(xì)胞產(chǎn)品后,請(qǐng)注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細(xì)檢查是否渾濁、是否細(xì)菌污染。因在運(yùn)輸過(guò)程中存在顛簸,且有些細(xì)胞對(duì)溫度變化也很敏感,可能存在一些細(xì)胞脫落漂浮的情況,這些細(xì)胞仍是活細(xì)胞,請(qǐng)勿丟棄,可離心富集后傳代使用。
2. 對(duì)于貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,在生物安全柜環(huán)境中,用真空泵去除培養(yǎng)瓶中的多余培養(yǎng)基,至剩余5-8mL左右,隨后將細(xì)胞置于含有5% CO2的37℃恒溫 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶,請(qǐng)立即傳代。
3. 對(duì)于懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞,在生物安全柜環(huán)境中,轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞至離心管中,離心200×g / 5 - 10 min,去除上清后,用5 mL培養(yǎng)基吹散細(xì)胞,轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,隨后置于含有5% CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
凍存細(xì)胞操作步驟:
注意:為保存細(xì)胞的高存活率,請(qǐng)收到產(chǎn)品后,立即解凍培養(yǎng)。
1.將凍存管置于37℃ 水浴中來(lái)回晃動(dòng),迅速解凍。為避免污染,確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速,大約2分鐘。
2. 一旦凍存管中液體融化后,立即取出,采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開(kāi)始,后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中, 離心200×g / 5 - 10 min,用真空泵去除含有凍存液的上清。
4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細(xì)胞復(fù)蘇的存活率,請(qǐng)將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。
5. 將細(xì)胞置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞產(chǎn)品的售后政策:
1、收到細(xì)胞24小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)細(xì)菌、真菌、霉菌污染,72小時(shí)檢測(cè)支原體陽(yáng)性無(wú)條件重發(fā);
2、享有1個(gè)月的超長(zhǎng)售后免責(zé)期;
3、1個(gè)月內(nèi),如果第三方鑒定STR錯(cuò)誤,可退細(xì)胞款項(xiàng)。
4. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的問(wèn)題:丟件、瓶身破損、培養(yǎng)液滲漏;
5. 細(xì)胞污染問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品24小時(shí)內(nèi),給我們提供真實(shí)有效實(shí)驗(yàn)結(jié)果,供核實(shí);
6. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞經(jīng)過(guò)24小時(shí)靜置后,有大部分細(xì)胞未存活(需提供真實(shí)、清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片)
7. 干冰凍存管發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇之后,有大部分細(xì)胞未存活(需提供真實(shí)、清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片);
關(guān)鍵字: SF767;人腦瘤細(xì)胞;
上海鈺博生物科技有限公司是2012年5月由“海歸”組成的創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)與兩個(gè)專業(yè)投資機(jī)構(gòu)發(fā)起成立的,以
開(kāi)發(fā)生產(chǎn)科研試劑和特色檢驗(yàn)產(chǎn)品為方向,經(jīng)過(guò)兩年多的努力,已經(jīng)建立了免疫學(xué)和分子生物學(xué)的五個(gè)技術(shù)平臺(tái),開(kāi)發(fā)了ELISA/ELISpot酶聯(lián)免疫試劑盒、重組蛋白、熒光標(biāo)記抗體、四聚體(Tetramer)特異性T細(xì)胞檢測(cè)試劑盒、Aimplex流式高通量多因子檢測(cè)、microRNA表達(dá)譜分析和功能研究等系列產(chǎn)品和服務(wù),與國(guó)內(nèi)外免疫學(xué)、干細(xì)胞、傳染病和腫瘤研究及臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域的科學(xué)家們建立了良好的合作關(guān)系,形成了一定的品牌影響力。鈺博生物另建有七大技術(shù)服務(wù)平臺(tái)(ELISA定制服務(wù),免疫學(xué)檢測(cè)服務(wù)、分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù)、蛋白表達(dá)與純化技術(shù)服務(wù)、抗體制備技術(shù)服務(wù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、整體實(shí)驗(yàn)課題服務(wù)。用專業(yè)的知識(shí)、專業(yè)的設(shè)備、專業(yè)的態(tài)度為客戶提供一站式實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)!