B16F0 小鼠黑色素瘤細胞

細胞背景與特性

來源與類型

B16F0是C57BL/6小鼠源性黑色素瘤細胞系，源自B16細胞的亞克隆，具有高轉移性和強致瘤性，廣泛用于模擬惡性黑色素瘤的侵襲與轉移。

細胞特性：

種屬來源:人

性別年齡:小鼠

組織來源:皮膚

生長特性:貼壁生長

細胞形態(tài):上皮細胞樣

細胞規(guī)格:1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件:DMEM+10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

凍存條件:90% FBS + 10% DMSO

傳代方法:1:3傳代, 2-3天傳1代

基本特性:

形態(tài)：貼壁生長，呈梭形或星形，胞質含黑色素顆粒（可通過顯微鏡觀察）。

遺傳背景：保留黑色素合成能力（酪氨酸酶活性），但不同傳代次數(shù)可能導致黑色素產(chǎn)量差異。

轉移傾向：高肺轉移潛能，常用于體內(nèi)轉移模型構建。

培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)基：DMEM（高糖）或 RPMI-1640，補充10%胎牛血清（FBS）及1%雙抗（青霉素/鏈霉素）。

培養(yǎng)環(huán)境：37°C、5% CO?，貼壁生長，傳代周期約2-3天（80%匯合時）。

消化方法：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分鐘（過度消化易導致黑色素流失），離心后重懸接種（建議傳代比例1:3至1:5）。

凍存與復蘇：含10% DMSO的凍存液，液氮保存；復蘇后需靜置24小時再換液以穩(wěn)定狀態(tài)。

研究應用方向

轉移機制研究

通過尾靜脈注射構建肺轉移模型，研究趨化因子（如CXCR4）或基質金屬蛋白酶（MMPs）的作用。

體內(nèi)外實驗結合，評估抗轉移藥物（如靶向MEK/ERK通路抑制劑）。

免疫治療模型

與免疫細胞（如T細胞、NK細胞）共培養(yǎng)，測試PD-1/CTLA-4抗體療效。

構建C57BL/6小鼠皮下移植瘤，評估免疫檢查點阻斷劑的抗腫瘤效果。

黑色素合成調控

研究α-MSH（促黑素細胞激素）或小分子化合物對酪氨酸酶活性的影響。

注意事項與常見問題

黑色素沉積差異

高傳代可能導致黑色素合成減少，建議定期檢測酪氨酸酶活性或使用低傳代細胞。

支原體污染風險

嚴格無菌操作，定期進行支原體檢測（如PCR或Hoechst染色）。

體內(nèi)實驗優(yōu)化

皮下接種時細胞量建議1×10?至1×10?/小鼠（成瘤時間約7-14天）。

尾靜脈注射用于轉移模型時，細胞量控制在2×10?/小鼠（肺結節(jié)計數(shù)需14-21天）。

公司出售的產(chǎn)品：

 注意事項：

污染防控：細菌污染：培養(yǎng)液渾濁、變黃，需添加抗生素（如青霉素-鏈霉素），污染嚴重時丟棄。

霉菌污染：顯微鏡下可見絲狀/絮狀漂浮物，需徹底消毒培養(yǎng)箱（過氧乙酸擦拭+紫外線照射），污染細胞立即丟棄。

支原體污染：無明顯外觀變化，需定期用PCR或熒光法檢測，污染后可用支原體清除試劑處理。

操作規(guī)范：收到細胞后，先檢查包裝完整性及干冰狀態(tài)，鏡檢細胞形態(tài)并拍照記錄（40x、100x、200x）。

未開封細胞若污染或活性差（3天內(nèi)反饋），可申請重發(fā)；客戶操作失誤導致問題不重發(fā)。

運輸與保存：干冰運輸：凍存管含1×10? cells，收到后立即轉入液氮或-80℃冰箱。

常溫運輸：T25培養(yǎng)瓶，收到后靜置3-4小時穩(wěn)定狀態(tài)，再換液或傳代。