土壤β-葡萄糖苷酶(Solid-β-Glucosidase,S-β-GC)試劑盒說明書
微量法 100管/48樣
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
S-β-GC能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團(tuán)之間的糖苷鍵生成葡萄糖,是纖維素分解酶系中重要組成成分之一,在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。
測(cè)定原理:
S-β-GC能夠催化對(duì)-硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。
試劑組成和配制:
產(chǎn)品名稱 | SSQ008-100T/48S | Storage |
試劑一:甲苯 | 5ml(自備) | 4℃ |
試劑二:粉劑 | 1瓶 | -20℃ |
試劑三:液體 | 20ml | 4℃ |
試劑四:液體 | 15ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入10ml蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑仍-20℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
測(cè)定步驟:
分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至400nm,蒸餾水調(diào)零。
加樣表。
試劑名稱 | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
風(fēng)干土樣(g) | 0.02 | 0.02 |
試劑一(μl) | 10 | 10 |
| 室溫振蕩混勻15min | 90℃振蕩混勻15min |
試劑二(μl) | 130 |
|
蒸餾水 |
| 130 |
試劑三(μl) | 160 | 160 |
混勻, 37℃振蕩反應(yīng)1h后,90℃水浴5min(蓋緊,防止水分散失),流水冷卻,
10000g 25℃離心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列試劑)
充分混勻,室溫靜置2min后, 400nm處測(cè)定吸光值A(chǔ),計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
S-β-GC活力計(jì)算:
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0032x -0.0027;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/L),y為吸光值。
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol對(duì)-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。
S-β-GC活力(μmol/d/g 土樣)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反總÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)
T:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24d; V反總:反應(yīng)體系總體積:3×10-4 L;W:樣本質(zhì)量,0.02g。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0016x -0.0027;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/L),y為吸光值。
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol對(duì)-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。
S-β-GC活力(μmol/d/g 土樣)= (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V反總÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)
T:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24d; V反總:反應(yīng)體系總體積:3×10-4 L;W:樣本質(zhì)量,0.02g。
關(guān)鍵字: 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)檢測(cè)試;
伊勢(shì)久(江蘇連云港)生物科技有限責(zé)任公司,成立于2019年,坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦,主要從事生化檢測(cè)、病理檢測(cè)和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運(yùn)行,其中包括150平米的超十萬級(jí)的潔凈車間。我司堅(jiān)持以自主研發(fā)為核心,現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品,熱銷市場(chǎng)以來收到了客戶的廣泛好評(píng)。
公司秉承“ 摯誠科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念,聚焦于前沿生物技術(shù)的應(yīng)用和創(chuàng)新,努力成為生物科技領(lǐng)域的標(biāo)桿企業(yè)。堅(jiān)持以客戶為中心,致力于為中國的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)服務(wù),始終是我們努力的目標(biāo)和方向。