α-淀粉酶(α-amylase，α-AL)試劑盒
(微量法100T/48S)
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
淀粉水解酶，包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-AL(EC3.2.1.1)隨機(jī)催化淀粉中α-1,4-糖苷鍵水解，生
成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖，同時使淀粉的粘度降低，因此又稱為液化酶。
測定原理：
淀粉水解酶催化淀粉水解生成還原糖，還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)，在540nm有
吸收峰；通過測定540nm吸光度增加速率，計算淀粉酶活性。α-AL耐熱，但是β-淀粉酶可在70℃鈍化
15min。因此粗酶液經(jīng)過70℃鈍化15min，就只有α-AL能夠催化淀粉水解。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、
研缽和蒸餾水。
粗酶液提取:
組織：稱取0.1~0.2g樣本(建議稱取約0.1g樣本)，加1mL蒸餾水勻漿；將勻漿倒入離心管
中，在室溫下放置提取15min，每隔5min振蕩1次，使其充分提取；3000g，25℃離心10min，吸取
上清液并且加蒸餾水定容至10mL，搖勻，即為淀粉酶原液。
血清(漿)：直接檢測。
操作步驟和加樣表(在EP管中依次加入下列試劑)：
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長到540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、試劑一和試劑二40℃預(yù)熱10min。
α-淀粉酶活性計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸曲線為y=3.7215x-0.1778；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL)，y為吸光值。
2、α-淀粉酶活性
(1)按照樣本質(zhì)量計算
單位定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活力單位。
α-淀粉酶活性(mg/min/g鮮重)=[(ΔA＋0.1778)÷3.7215×V反總]÷(W×V樣÷V樣總)÷T=
1.075×(ΔA＋0.1778)÷W
(2)按照蛋白質(zhì)含量計算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活性單位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mgprot)=[(ΔA＋0.1778)÷3.7215×V反總]÷(V樣×Cpr)÷T=0.1075×(ΔA
＋0.1778)÷Cpr
(3)血清(漿)樣本中α-淀粉酶活性計算
單位定義：每mL血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活性單位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mL)=[(ΔA＋0.1778)÷3.7215×V反總]÷V樣÷T=0.1075×(ΔA＋0.1778)
反總：反應(yīng)體系總體積，0.15mL；V樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.075mL；V樣總：提取液總體
積，10mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，5min。
b.用96孔板測定的計算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸曲線為y=2.481x-0.1778；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL)，y為吸光值。
2、α-淀粉酶活性
(1)按照樣本質(zhì)量計算
單位定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活力單位。
α-淀粉酶活性(mg/min/g鮮重)=[(ΔA＋0.1778)÷2.481×V反總]÷(W×V樣÷V樣總)÷T=
1.612×(ΔA＋0.1778)÷W
(2)按照蛋白質(zhì)含量計算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活性單位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mgprot)=[(ΔA＋0.1778)÷2.481×V反總]÷(V樣×Cpr)÷T=0.1612×(ΔA
＋0.1778)÷Cpr
(3)血清(漿)樣本中α-淀粉酶活性計算
單位定義：每mL血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活性單位。
關(guān)鍵字： α-淀粉酶（α-AL）檢測試劑盒;
伊勢久（江蘇連云港）生物科技有限責(zé)任公司，成立于2019年，坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦，主要從事生化檢測、病理檢測和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運(yùn)行，其中包括150平米的超十萬級的潔凈車間。我司堅持以自主研發(fā)為核心，現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品，熱銷市場以來收到了客戶的廣泛好評。
公司秉承“ 摯誠科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念，聚焦于前沿生物技術(shù)的應(yīng)用和創(chuàng)新，努力成為生物科技領(lǐng)域的標(biāo)桿企業(yè)。堅持以客戶為中心，致力于為中國的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)服務(wù)，始終是我們努力的目標(biāo)和方向。