植物類黃酮(Flavonoid)試劑盒說明書
分光光度法 50管/48樣
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
類黃酮是一類多苯化合物,屬于植物次生代謝物,對人體具有消炎,抗菌,降血脂,清除體內(nèi)羥自由基,預(yù)防癌癥等作用。
測定原理:
在堿性亞硝酸鹽溶液中,類黃酮與鋁離子形成在510nm處有特征吸收峰的紅色絡(luò)合物,測定樣品提取液在510nm處的吸光值,即可計算樣品類黃酮含量。
組成:
產(chǎn)品名稱
AO003-50T/48S
Storage
提取液:
60%乙醇,自備
4℃
試劑一:液體
2ml
試劑二:液體
試劑三:液體
20ml
說明書
一份
自備儀器和用品:
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1ml玻璃比色皿、蒸餾水。
類黃酮提取
將樣本烘干至恒重,粉碎,過40目篩之后,稱取約0.02g,加入2ml提取液,60℃振蕩提取2h,10000g,25℃,離心10min,取上清待測。
測定操作表
分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至510nm,蒸餾水調(diào)零。
操作表
空白管
測定管
樣本待測液(μl)
540
蒸餾水(μl)
試劑一(μl)
30
混勻,25℃靜置6min
試劑二(μl)
混勻,25℃靜置5min
試劑三(μl)
400
混勻,25℃靜置15 min,測定510nm處吸光值。ΔA=A測定-A空白,空白管只要做一管。
類黃酮含量計算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 5.02x+0.0007,R2 = 0.9996
類黃酮含量(mg/g 干重)=(ΔA -0.0007)÷5.02÷(W÷V樣總)
= 0.398×(ΔA -0.0007)÷W
V樣總:加入提取液體積,2ml; V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.54ml; W:樣品質(zhì)量,g
最低檢出限為10μg/g。
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